“高通量篩選-體外檢測-體內驗證”全鏈條CHIKV藥效評價解決方案

2025年夏季，廣東省佛山市暴發了我國迄今規模最大的基孔肯雅熱本地疫情，報告病例數逾6000例。此次疫情與全球多地暴發態勢同步，留尼汪島、巴基斯坦、印度等地同期也報告了大規模疫情，世界衛生組織（WHO）為此發出全球行動倡議。

為應對此類蚊媒傳染病帶來的持續威脅，我國進一步從制度層面強化防控——于2026年3月16日宣布，自當年4月1日起，將基孔肯雅熱納入《中華人民共和國傳染病防治法》規定的乙類傳染病進行管理，并采取相應預防與控制措施。這標志著我國對重點蟲媒傳染病的監防體系進入了制度化、精準化的新階段。

同時，為面對基孔肯雅熱在全球多地的再度暴發，復旦大學附屬華山醫院在期刊《Emerging Microbes & Infections》上也發表了題為《Global resurgence of Chikungunya virus: outbreak drivers and emerging solutions》的重磅綜述。

該綜述不僅綜合解析了導致疫情卷土重來的多重因素，也梳理了從監測到干預的技術進展。其研究成果既為國際社會提供了協同防控的科學視角，也為我國完善蟲媒傳染病防控體系給出了關鍵指引。在這一背景下，深入理解基孔肯雅熱這一疾病本身至關重要。

基孔肯雅熱：全球蔓延的蚊媒傳染病威脅

基孔肯雅病毒主要通過伊蚊傳播，感染者常見發熱、劇烈關節痛及皮疹，近半數可能轉為慢性關節疼痛，影響持久。該病毒自20世紀50年代在非洲首次發現后，已擴散至全球超過110個熱帶和亞熱帶國家和地區。

圖1. 各區域疫情概況及近期反復暴發疫情匯總

2025年，廣東佛山發生規模為國內迄今最大，由輸入病例引起的本地傳播疫情，病毒測序顯示其屬于東中南部非洲基因型。與此同時，全球多國疫情呈現多點爆發態勢，包括留尼汪島、巴基斯坦、印度等地均出現較大規模聚集性疫情，反映出該病毒在全球范圍內的持續傳播與公共衛生挑戰。

全球基孔肯雅熱活躍的深層原因

當前基孔肯雅熱在多地的反復流行，是環境、病原體與人為因素共同驅動的結果。

首先，外部環境變化構成了基礎。氣候變化導致的濕熱天氣，為媒介伊蚊的大量繁殖創造了理想條件。全球化背景下頻繁的國際旅行與貿易，則極大地加速了病毒通過輸入病例在不同地域間的擴散。

其次，病毒自身的適應性進化是關鍵。病毒基因組，特別是編碼包膜蛋白的基因發生了一系列突變（如E1-A226V）。這些突變增強了病毒對白紋伊蚊、埃及伊蚊等主要媒介的感染與傳播效率，使得變異毒株的流行能力顯著加強。

圖2.病毒顆粒結構示意圖

最后，公共衛生系統的現實短板放大了風險。該病臨床癥狀與其他蚊媒傳染病相似，存在誤診和漏診的可能。社區層面的疾病監測若存在薄弱環節，便難以早期發現隱匿的傳播鏈。此外，在社會動蕩或資源有限的地區，基礎的病媒控制與病例管理措施往往難以落實，導致疫情更易失控蔓延。

基孔肯雅熱防控策略與技術進展

面對基孔肯雅熱的威脅，全球的應對策略已從應急響應向包含“監測-阻斷-保護”的綜合精準防控體系發展。

在阻斷傳播環節，媒介控制是核心。以2025年佛山疫情為例，在應急化學消殺后，當地綜合采用了環境治理、生物防治（如投放特定魚類、釋放攜帶共生菌的絕育雄蚊）等手段，使關鍵區域的蚊媒密度指標快速下降，有效遏制了疫情。以沃爾巴克氏體技術為代表的新型生物防控方法，正成為可持續降低蚊媒傳播能力的重要工具。

監測預警技術的進步提升了響應速度。基于核酸檢測的實驗室確診方法依然是金標準，而可同時檢測多種病原體的聯檢技術，在混合流行區顯示出優勢。更具前瞻性的是，對城市污水進行病毒監測，能夠早期發現社區中的隱匿傳播信號，實現預警關口前移。

疫苗研發的突破為主動防護帶來了希望。截至2025年，全球已有兩款疫苗獲批上市。其中，VLA1553是一款單劑次疫苗，適用于成年人，在臨床試驗中顯示出良好的免疫原性。另一款PXVX0317疫苗也于2025年獲準用于12歲以上人群。此外，基于病毒樣顆粒、mRNA等新技術的多種候選疫苗也正在研發中，旨在提供更優的保護。

應對基孔肯雅熱：經驗、挑戰與全球協作

基孔肯雅熱的全球重現，是環境變化、病毒進化與社會因素交織的復雜結果。以廣東佛山為例，其通過媒介綜合治理、精準監測預警與公眾宣教相結合的策略，證明了本地疫情是能夠被有效控制的。

然而，全球防控仍面臨嚴峻挑戰。這包括：疫苗在全球，特別是高風險地區的不公平可及；病毒持續變異帶來的不確定性；以及不同國家和地區在監測、診斷和響應能力上存在顯著差距。

要有效遏制這一威脅，必須深化國際協作。這需要建立全球性的病毒變異監測網絡，以追蹤流行趨勢；促進疫苗技術的共享與公平分配；加強對氣候與疫情關聯的前瞻性研究，以指導資源預置；并著力支持公共衛生基礎薄弱地區的能力建設。只有通過這種全方位的協同努力，才能構建起抵御蚊媒病毒全球傳播的堅固防線。將上述對疫情的科學認知轉化為實際防治工具，離不開前沿的CHIKV藥物研發平臺支持。

「DIFF CRO」：提供CHIKV創新藥研發的整合型解決方案

在基孔肯雅熱（CHIKV）創新藥研發領域，「DIFF CRO」為客戶提供覆蓋“體外檢測-高通量篩選-體內驗證”全鏈條的整合型研發解決方案。我們的服務旨在直接切入藥物與疫苗研發的核心痛點，以獨家技術平臺和嚴謹的模型設計，加速候選物從早期發現走向臨床前研究的進程。

基孔肯雅熱假病毒中和抗體檢測

為評估疫苗免疫效果或治療性抗體的效力，我們提供基于熒光斑點計數法的中和抗體檢測服務。該平臺靈敏度高、重復性好，適用于高通量樣本分析，能為免疫原性評價提供關鍵數據支持。

圖3. 基孔肯雅熱假病毒中和抗體檢測流程圖

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服務內容

表1.CHIKV血清中和抗體檢測服務

針對基孔肯雅熱假病毒的白酶抑制劑篩選系統

新型基孔肯雅熱病毒蛋白酶抑制劑的發現對于抗基孔肯雅熱病毒藥物研發至關重要，其蛋白酶抑制劑靶點為nsP2半胱氨酸蛋白酶。在大量化合物中尋找CHIKV蛋白酶抑制劑的過程中，行業急需一種可實現無需活病毒參與的細胞水平的正向篩選方式，以助力新藥研發。

由「DIFF CRO」獨家開發的蛋白酶抑制劑篩選系統（DIFF-rGFP），可在細胞水平直接模擬病毒自然感染過程，杜絕漏篩和假陽性等情況。我們以檢測和篩選SARS-COV-2藥物為例，展示「DIFF CRO」開發的蛋白酶抑制劑篩選系統的一系列優勢：

1）最簡便

肉眼觀測

DIFF-rGFP可通過肉眼直接觀察藥物反應的熒光變化（圖4），進行定性判斷。

圖4.分別在GFP15和GFP18上，插入不同的識別CHIKV NSP2蛋白酶切序列A1、B1或C1，表達蛋白酶后，GFP都有明顯減弱。

2）最準確

原理可靠

本系統基于特制質粒的共表達機制，以SARS-COV-2為例，結合重組綠色熒光蛋白（rGFP）和SARS-COV-2的3CL蛋白酶。在該系統中，rGFP序列中嵌入了3CL蛋白酶的特異性切割位點。當3CL蛋白酶功能正常時，會特異性裂解rGFP，導致其熒光功能喪失，熒光強度減弱。相反，當抑制劑有效抑制了3CL蛋白酶的活性時，rGFP無法被切割，維持其完整性并正常發出熒光，熒光強度增強（圖5）。藥物有效性與熒光強度成正相關，是一種更直觀的正向篩選方式。

圖5. DIFF蛋白酶抑制劑篩選系統原理圖

3）結果準確

系統實驗結果與真病毒檢測結果高度一致。使用活病毒進行檢測，GC376的IC??值為4.69μM；而采用DIFF-rGFP，IC??值為6.44μM，兩種方法測得的IC??值高度相近（圖6）。

圖6. 使用活病毒和DIFF-rGFP測得的IC??值

圖7. 添加不同濃度SARS-COV-2蛋白酶抑制劑72h后熒光檢測值

4）可進行高通量篩選

系統檢測的熒光值低而信噪比好，可聯合現有藥物庫，一周即可篩選1-10萬個基孔肯雅熱病毒藥物候選化合物，快速鎖定有效藥物（圖8）。

圖8. 高通量篩選操作示意圖

DIFF CHIKV體內攻毒模型

為驗證疫苗或藥物的體內保護效果，我們建立了成熟的CHIKV小鼠攻毒模型。該模型采用VSV-CHIKV重組毒株，通過顱內注射和滴鼻感染兩種途徑，模擬病毒不同入侵方式。

實驗分組：

實驗方法：

實驗結果：

圖9.攻毒后BALB/c小鼠的體重變化情況

攻毒后小鼠均未出現死亡現象，體重一度下降至原始水平的80%左右，隨后逐漸恢復，提示兩種攻毒方式均能穩定對小鼠造成感染。

圖10.qRT-PCR檢測攻毒后BALB/c小鼠的腦、鼻甲、脾臟部組織的病毒載量情況

取材攻毒后小鼠的腦、鼻甲、脾臟組織，采用qRT-PCR檢測病毒拷貝數：結果顯示：

l 滴鼻組鼻甲組織病毒載量達到1.5*10?copies/g

l 顱內注射組腦組織病毒載量達到3*10?copies/g

l 兩種攻毒方式下，脾臟病毒載量均超過5*10?copies/g；

根據檢測結果，小鼠各組織的病毒載量高，并且各組織病毒載量具備顯著性差異，成功模擬了CHIKV在多組織中的復制與分布特點。 

DIFF CHIKV體內攻毒模型毒株信息

我司特色的DIFF CHIKV體內攻毒模型，憑借高度模擬人體感染特征的獨特設計，具備以下優勢：

l 多組織（腦、鼻甲、脾臟等）中實現穩定病毒復制

l qRT-PCR定量檢測，直觀揭示病毒載量差異

l 為疫苗研發與抗病毒藥物篩選提供關鍵的體內數據

「DIFF CRO」CHIKV攻毒模型，為科研機構與制藥企業提供可靠、精準、高效的實驗平臺，加速創新療法從實驗室走向臨床。讓我們攜手推動科研突破，為全球抗擊基孔肯雅熱貢獻力量！

參考文獻：

Zhang Y, Wu J, Cheng X, et al. Global resurgence of Chikungunya virus: outbreak drivers and emerging solutions. Emerg Microbes Infect. 2026 Dec;15(1):2603714.