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Alpha-突觸核蛋白操作指南(5)—怎樣確定Alpha突觸核蛋白濃度

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怎樣確定Alpha突觸核蛋白濃度.png

怎樣確定Alpha突觸核蛋白濃度

重要提示:由于前體原纖維 (PFF)的結(jié)構(gòu)限制會(huì)影響吸光度,除非PFF結(jié)構(gòu)被破壞并還原為單體,否則無法準(zhǔn)確計(jì)算其濃度。多相系統(tǒng)(懸浮液)、超聲處理水平和纖維長(zhǎng)度也會(huì)影響測(cè)量濃度的準(zhǔn)確度。出于這些原因,科學(xué)文獻(xiàn)明確指出,應(yīng)在纖維化之前進(jìn)行 α-突觸核蛋白濃度測(cè)定。

? 測(cè)量280nm的吸光度并使用α-突觸核蛋白的消光系數(shù)來確定單體濃度。

? 運(yùn)行確定濃度的SDS凝膠以檢查純度并直觀地確認(rèn)濃度。

? 將單體移入纖維化過程。

? 進(jìn)行沉降試驗(yàn),確保所需量的材料已轉(zhuǎn)化為manzu CoA所需值的不溶性原纖維含量(超過90%)。

 

 

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