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Alpha-突觸核蛋白操作指南(5)—怎樣確定Alpha突觸核蛋白濃度

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怎樣確定Alpha突觸核蛋白濃度

重要提示:由于前體原纖維 (PFF)的結構限制會影響吸光度,除非PFF結構被破壞并還原為單體,否則無法準確計算其濃度。多相系統(懸浮液)、超聲處理水平和纖維長度也會影響測量濃度的準確度。出于這些原因,科學文獻明確指出,應在纖維化之前進行 α-突觸核蛋白濃度測定。

? 測量280nm的吸光度并使用α-突觸核蛋白的消光系數來確定單體濃度。

? 運行確定濃度的SDS凝膠以檢查純度并直觀地確認濃度。

? 將單體移入纖維化過程。

? 進行沉降試驗,確保所需量的材料已轉化為manzu CoA所需值的不溶性原纖維含量(超過90%)。

 

 

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