正常原代細胞在培養過程中只能增殖有限數量的細胞群倍,之后就會出現生長停滯和衰老表型。細胞衰老是一種穩定的細胞周期停滯狀態,衰老細胞的特點是不可逆的G1生長抑制,涉及抑制驅動細胞周期進程的基因以及細胞周期抑制因子(如p16INK4a、p53及其轉錄靶點p21CIP1)的上調。它們對有絲分裂誘導的增殖具有抵抗力,并且形態上細胞也會呈現異常增大和扁平狀。細胞衰老可以通過檢測衰老細胞的標志物來檢測,如酸性衰老相關β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)。
Cell Biolabs提供3種檢測SA-β-Gal的試劑盒,為細胞衰老相關研究助力。
● 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Activity, Fluorometric Format)
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貨號 |
CBA-231、CBA-231-5 |
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規格 |
120 assays、5 x 120 assays |
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檢測 |
熒光酶標儀 |
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組成 |
2 x Cell Lysis Buffer 2 x Reaction Buffer SA-β-Gal Substrate (20x) Stop Solution |
該試劑盒通過熒光底物測量SA-β-Gal的活性,提供了一種易于使用和高效的方法來確定細胞衰老。具體產品信息詳見官網說明書。
● Quantitative Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal, Fluorometric)
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貨號 |
CBA-232、CBA-232-5 |
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規格 |
10 assays (35 mm dishes)、5 x 10 assays (35 mm dishes) |
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檢測 |
熒光顯微鏡/流式細胞術 |
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組成 |
Cell Pretreatment Solution (1000x) SA-β-Gal Substrate (200x) |
該定量檢測試劑盒使用熒光底物來測量SA-β-Gal活性。這種化合物是β-半乳糖苷酶的一種膜滲透性非熒光底物,它在半乳糖殘基水解后會發出綠色熒光,并保留在細胞內。與使用X-gal 的傳統細胞化學測定相比,使用熒光底物大大提高了測定的靈敏度。此外,無毒的熒光底物還可以通過流式細胞儀研究活細胞,對SA-β-Gal活性進行定量。每個試劑盒可在35 mm培養皿中進行多達10個assay。具體產品信息詳見官網說明書。
● Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Staining)
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貨號 |
CBA-230、CBA-230-5 |
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規格 |
50 assays、5 x 50 assays |
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檢測 |
光學顯微鏡 |
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組成 |
100x Fixing Solution Staining Solution A Staining Solution B Staining Solution C Staining Solution D X-gal Solution |
該試劑盒利用SA-β-Gal催化X-gal的水解,在衰老細胞中 產生藍色,將結果可視化。每個試劑盒都提供足量的試劑,可在35mm的培養皿中進行50個assay。具體產品信息詳見官網說明書。
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