? ? ? ?上篇推文小編給大家解讀了2022年5月20日發表于elife雜志的客戶文章，本文將具體側重介紹腺相關病毒（Adeno-associated virus, AAV）、水泡性口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus，VSV）和慢病毒（Lentivirus，LV）在獼猴上表達的效果，三者之間的差異比較，以及AAV注射相關問題。
一、表達效果
病毒類型：AAV（腺相關病毒）
注射腦區：丘腦（MD），皮層（Cortex），腹外側前額葉皮層（vlPFC）
表達天數：45天，75/110天
表達情況：神經元胞體標記良好，神經軸突纖維標記良好。
病毒類型：VSV（水泡性口炎病毒）
注射腦區：丘腦（MD），皮層（Cortex）
表達天數：5天，30天
表達情況：胞體標記良好，近端神經突標記，無長程軸突纖維標記(5天)；軸突丟失、神經元死亡(30天)。
病毒類型：LV（慢病毒）
注射腦區：丘腦（MD），皮層（Cortex）
表達天數：260天
表達情況：胞體標記良好，無長程軸突纖維標記。
二、三種病毒的表達比較
? ? ? ?小結：AAV良好標記神經元胞體以及纖維；VSV良好標記神經元胞體和近端纖維，不標記遠端軸突，且隨著時間的發展發生細胞死亡；LV良好標記胞體，不標記軸突。
三、表達特異性
? ? ? ?如下圖所示，AAV2/9-CaMKIIα-Tau-GFP 帶有興奮性神經元特異性啟動子，并通過GFP標記感染細胞。作者通過免疫熒光染色，檢測GFP與神經元標志物NeuN和星型膠質細胞標志物GFAP的共標情況，可以看到病毒特異性標記神經元細胞。
四、安全性
? ? ? ?在本實驗中，研究人員在食蟹猴腦注射病毒后，在AAV表達時長長達110天后進行實驗（且無報道異常），說明感染AAV后猴可以存活至少110天。
? ? ? ?M：雄性；F：雌性；MD：內側丘腦；vlPFC：腹外側前額葉；UbC：人泛素C；hSyn：人突觸蛋白I；CaMKII：鈣離子/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶II；d：天
五、滴度、劑量
? ? ? ?本實驗中AAV來源于樞密科技，病毒滴度高達8.47x1013vg/mL，表達時間長，安全性高，特異性標記神經元細胞。位點注射劑量為10-20μL。
? ? ? ?病毒注射: 注射速度從200納升/分鐘開始，增加到400納升/分鐘；總注射量為10-20微升。
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