hMPV疫苗開發(fā)之路
hMPV(人類偏肺病毒)于2001年被荷蘭研究人員發(fā)現(xiàn)，屬于肺病毒科偏肺病毒屬，與RSV（呼吸道合胞病毒）非常相似。hMPV與 RSV 是引起兒童下呼吸道感染的兩大主要病毒病原，且hMPV感染也是造成免疫功能缺陷病人和老年人發(fā)病及死亡的原因之一。hMPV疫苗開發(fā)旨在最終能夠降低這一重要病原h(huán)MPV感染引起的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
福爾馬林滅活疫苗因其穩(wěn)定性良好、易于生產(chǎn)、病毒充分滅活無返祖危險(xiǎn)存在等特點(diǎn)，被普遍應(yīng)用于病毒疫苗研制。但福爾馬林滅活的hMPV疫苗在接種后的自然感染中可能出現(xiàn)VED（疫苗增強(qiáng)性疾病，Vaccine-enhanced disease）效應(yīng)而加重疾病，在隨后的免疫攻毒實(shí)驗(yàn)中也觀察到了疫苗加強(qiáng)的肺部疾病及T2反應(yīng)，提示福爾馬林滅活的hMPV疫苗可能不適用于hMPV疫苗研究1。
隨著技術(shù)的進(jìn)步和新方法的開發(fā)，越來越多的新型hMPV疫苗進(jìn)入后期臨床實(shí)驗(yàn)。截至 2024 年 7 月，牛津大學(xué)（University of Oxford）的科學(xué)家們啟動(dòng)了一項(xiàng)第一階段研究，對(duì)兩種正在研究的 mRNA 疫苗進(jìn)行測(cè)試：一種是同時(shí)針對(duì)呼吸道合胞病毒（RSV）和人類偏肺病毒（hMPV）的疫苗，另一種是只針對(duì)五到八個(gè)月大嬰兒的 RSV 疫苗。這些疫苗由 Moderna 公司開發(fā)。
中和抗體檢測(cè)——hMPV疫苗評(píng)價(jià)金標(biāo)準(zhǔn)
hMPV是一種單鏈RNA病毒，由8個(gè)基因組成，編碼9種不同的蛋白質(zhì)，其膜蛋白共有3種，包括粘附蛋白(G)、小疏水蛋白(SH)及融合蛋白F（圖12），其中融合蛋白F是感染必需的，也是中和抗體的唯一靶蛋白。
圖1:hMPV病毒結(jié)構(gòu)示意圖
目前還沒有獲得批準(zhǔn)上市的hMPV疫苗和藥物，但有幾種有前途的減毒活疫苗，中和抗體檢測(cè)是鑒定疫苗有效性的黃金標(biāo)準(zhǔn)，迪福潤(rùn)絲生物測(cè)定hMPV中和抗體的方法主要有熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法（Focus-Forming Assay, FFA）、細(xì)胞病變效應(yīng)法（Cytopathic Effect, CPE）等。
hMPV臨床株的重要性
hMPV有A、B兩個(gè)基因型，每個(gè)基因型包括2個(gè)基因亞型，即A1、A2，B1、B2。目前有5個(gè)基因簇的HMPV在流行。hMPV臨床株的重要性體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
1. 反應(yīng)病毒自然存在的狀態(tài)：
臨床株反映了病毒在自然界和人體內(nèi)的實(shí)際變異和存在形式。它們與在實(shí)驗(yàn)室中經(jīng)過多代培養(yǎng)或適應(yīng)的病毒株可能有一定的差異。
2. 具有基因多樣性：
臨床株可以展示病毒在不同患者間的基因變異，這有助于理解病毒的變異性和進(jìn)化。
3. 病原性和毒力：
通過研究臨床株，可以更準(zhǔn)確地了解病毒在自然感染中對(duì)人類健康的影響，包括其致病性和毒力。
4. 診斷和治療：
臨床株對(duì)于開發(fā)和驗(yàn)證診斷工具（如PCR試劑盒）、治療藥物和疫苗至關(guān)重要。研究臨床株有助于確保這些工具和產(chǎn)品能夠有效地識(shí)別和對(duì)抗自然界中的病毒。
5. 抗原性和免疫逃逸：
由于病毒會(huì)在自然宿主中產(chǎn)生突變，臨床株的研究可以揭示病毒如何通過突變逃避宿主的免疫反應(yīng)，這對(duì)疫苗的開發(fā)和更新至關(guān)重要。
6. 藥物敏感性：
通過對(duì)臨床株的藥物敏感性測(cè)試，可以了解病毒對(duì)抗病毒藥物的敏感性或耐藥性，指導(dǎo)臨床治療。
迪福潤(rùn)絲生物通過對(duì)hMPV臨床株的培養(yǎng)（圖2），完善了自有的生物資源庫(kù)（Bio Database）,可進(jìn)行更加準(zhǔn)確可靠的疫苗評(píng)價(jià)。檢測(cè)用毒株包括hMPV A和hMPV B兩種亞型共兩種毒株A2、B2（圖3）。
圖2.迪福潤(rùn)絲生物hMPV臨床樣本分離培養(yǎng)
圖3.迪福潤(rùn)絲生物hMPV毒株進(jìn)化樹
hMPV中和抗體檢測(cè)服務(wù)流程
迪福潤(rùn)絲生物「DIFF+」CRO服務(wù)平臺(tái)可針對(duì)hMPV疫苗及藥物進(jìn)行有效性評(píng)價(jià)，提供基于CPE法和熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法的hMPV中和抗體檢測(cè)服務(wù)，該檢測(cè)方法靈敏度高、檢測(cè)迅速，并且該實(shí)驗(yàn)方法的特異性、重復(fù)性均能滿足中和實(shí)驗(yàn)的要求，適用于高通量樣本的檢測(cè)。
hMPV中和抗體檢測(cè)流程圖
Created with biorender.com
毒株資源及服務(wù)內(nèi)容
基于上文所述的臨床株資源，迪福潤(rùn)絲生物能提供的hMPV毒株資源庫(kù)及中和抗體檢測(cè)服務(wù)見下表：
|
|
毒株類型 |
毒株名稱 |
|
hMPV毒株 |
hMPV-A |
A2 |
|
hMPV-B |
B2 |
|
hMPV血清中和抗體檢測(cè)服務(wù) |
|
|
樣本類型 |
血清、血漿或抗體樣本 |
|
檢測(cè)方法 |
CPE法、熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法 |
|
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn) |
提供自研的陽性對(duì)照（單抗） |
|
結(jié)果交付 |
檢測(cè)報(bào)告 |
參考文獻(xiàn)：
1. Ren J, Phan T, Bao X. Recent vaccine development for human metapneumovirus. J Gen Virol. 2015 Jul;96(Pt 7):1515-20. doi: 10.1099/vir.0.000083. Epub 2015 Feb 9. PMID: 25667325; PMCID: PMC4635448.
2. van den Hoogen BG, de Jong JC, Groen J, et al. A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease. Nat Med. 2001;7(6):719-724.