hMPV疫苗開發之路
hMPV(人類偏肺病毒)于2001年被荷蘭研究人員發現，屬于肺病毒科偏肺病毒屬，與RSV（呼吸道合胞病毒）非常相似。hMPV與 RSV 是引起兒童下呼吸道感染的兩大主要病毒病原，且hMPV感染也是造成免疫功能缺陷病人和老年人發病及死亡的原因之一。hMPV疫苗開發旨在最終能夠降低這一重要病原hMPV感染引起的經濟負擔。
福爾馬林滅活疫苗因其穩定性良好、易于生產、病毒充分滅活無返祖危險存在等特點，被普遍應用于病毒疫苗研制。但福爾馬林滅活的hMPV疫苗在接種后的自然感染中可能出現VED（疫苗增強性疾病，Vaccine-enhanced disease）效應而加重疾病，在隨后的免疫攻毒實驗中也觀察到了疫苗加強的肺部疾病及T2反應，提示福爾馬林滅活的hMPV疫苗可能不適用于hMPV疫苗研究1。
隨著技術的進步和新方法的開發，越來越多的新型hMPV疫苗進入后期臨床實驗。截至 2024 年 7 月，牛津大學（University of Oxford）的科學家們啟動了一項第一階段研究，對兩種正在研究的 mRNA 疫苗進行測試：一種是同時針對呼吸道合胞病毒（RSV）和人類偏肺病毒（hMPV）的疫苗，另一種是只針對五到八個月大嬰兒的 RSV 疫苗。這些疫苗由 Moderna 公司開發。
中和抗體檢測——hMPV疫苗評價金標準
hMPV是一種單鏈RNA病毒，由8個基因組成，編碼9種不同的蛋白質，其膜蛋白共有3種，包括粘附蛋白(G)、小疏水蛋白(SH)及融合蛋白F（圖12），其中融合蛋白F是感染必需的，也是中和抗體的唯一靶蛋白。
圖1:hMPV病毒結構示意圖
目前還沒有獲得批準上市的hMPV疫苗和藥物，但有幾種有前途的減毒活疫苗，中和抗體檢測是鑒定疫苗有效性的黃金標準，迪福潤絲生物測定hMPV中和抗體的方法主要有熒光斑點計數法（Focus-Forming Assay, FFA）、細胞病變效應法（Cytopathic Effect, CPE）等。
hMPV臨床株的重要性
hMPV有A、B兩個基因型，每個基因型包括2個基因亞型，即A1、A2，B1、B2。目前有5個基因簇的HMPV在流行。hMPV臨床株的重要性體現在以下幾個方面：
1. 反應病毒自然存在的狀態：
臨床株反映了病毒在自然界和人體內的實際變異和存在形式。它們與在實驗室中經過多代培養或適應的病毒株可能有一定的差異。
2. 具有基因多樣性：
臨床株可以展示病毒在不同患者間的基因變異，這有助于理解病毒的變異性和進化。
3. 病原性和毒力：
通過研究臨床株，可以更準確地了解病毒在自然感染中對人類健康的影響，包括其致病性和毒力。
4. 診斷和治療：
臨床株對于開發和驗證診斷工具（如PCR試劑盒）、治療藥物和疫苗至關重要。研究臨床株有助于確保這些工具和產品能夠有效地識別和對抗自然界中的病毒。
5. 抗原性和免疫逃逸：
由于病毒會在自然宿主中產生突變，臨床株的研究可以揭示病毒如何通過突變逃避宿主的免疫反應，這對疫苗的開發和更新至關重要。
6. 藥物敏感性：
通過對臨床株的藥物敏感性測試，可以了解病毒對抗病毒藥物的敏感性或耐藥性，指導臨床治療。
迪福潤絲生物通過對hMPV臨床株的培養（圖2），完善了自有的生物資源庫（Bio Database）,可進行更加準確可靠的疫苗評價。檢測用毒株包括hMPV A和hMPV B兩種亞型共兩種毒株A2、B2（圖3）。
圖2.迪福潤絲生物hMPV臨床樣本分離培養
圖3.迪福潤絲生物hMPV毒株進化樹
hMPV中和抗體檢測服務流程
迪福潤絲生物「DIFF+」CRO服務平臺可針對hMPV疫苗及藥物進行有效性評價，提供基于CPE法和熒光斑點計數法的hMPV中和抗體檢測服務，該檢測方法靈敏度高、檢測迅速，并且該實驗方法的特異性、重復性均能滿足中和實驗的要求，適用于高通量樣本的檢測。
hMPV中和抗體檢測流程圖
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毒株資源及服務內容
基于上文所述的臨床株資源，迪福潤絲生物能提供的hMPV毒株資源庫及中和抗體檢測服務見下表：
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毒株類型 |
毒株名稱 |
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hMPV毒株 |
hMPV-A |
A2 |
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hMPV-B |
B2 |
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hMPV血清中和抗體檢測服務 |
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樣本類型 |
血清、血漿或抗體樣本 |
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檢測方法 |
CPE法、熒光斑點計數法 |
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質控標準 |
提供自研的陽性對照（單抗） |
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結果交付 |
檢測報告 |
參考文獻：
1. Ren J, Phan T, Bao X. Recent vaccine development for human metapneumovirus. J Gen Virol. 2015 Jul;96(Pt 7):1515-20. doi: 10.1099/vir.0.000083. Epub 2015 Feb 9. PMID: 25667325; PMCID: PMC4635448.
2. van den Hoogen BG, de Jong JC, Groen J, et al. A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease. Nat Med. 2001;7(6):719-724.