很多同學都覺得構建細胞球體太不重要了 ,培養基也不重要,培養板也不重要 ,要么怎么可能有懸浮細胞呢? 懸浮細胞不就一養就懸浮了? 甚至有些細胞三天不加液不換液不就聚團了嗎?
懸浮細胞成團主要有以下幾個原因:
1.消化過程過于粗暴、吹打太用力、消化過久、消化液太強或有毒性等,會導致細胞死亡,細胞死亡后釋放出DNA,纏繞其他細胞,形成黏性的細胞團。
2. 細胞離心速度過大或時間太長,也容易造成細胞抱團。
3. 消化不完全時,細胞和細胞之間的連接沒有分開;消化過度時,圓形的細胞容易聚堆,再分開很困難。
4. 狀態不好、老化的細胞,也可能會出現抱團生長的情況,比如換液不及時、長得太滿才傳代、污染等造成的細胞狀態差。
5. 傳代時沒有吹打均勻,細胞團多,培養時就會是一團一團的。
6. 非震蕩培養或細菌量過多的話就會成團
這種聚團并不是細胞球體,細胞球體主要是由細胞間粘附形成,使用生長培養物的物理或者化學性質促使細胞聚集在一起形成3D結構。可以由細胞株、原代細胞或組織的片段構建。
細胞球體:具有較為規則的球形結構,內部細胞和外部細胞的生長環境和狀態可能存在差異,例如接近外表面的細胞灌注良好,代謝活躍,增殖快速,而球體的最內部細胞灌注相當差,代謝和增殖趨于停滯,在較大的細胞球內部甚至出現細胞壞死。
細胞球體:一般需要在非依賴型(anchorage-independent condition)的培養皿中培養,選用低吸附培養板加腫瘤干細胞成球培養基(啟達生物,貨號:P2401)培養。

細胞成球后使用共聚焦顯微拍攝

細胞成團后使用共聚焦顯微鏡拍攝
兩者的科研應用:
細胞成團:通常需要避免細胞成團,以保證細胞培養的正常進行。
細胞球體:廣泛用于評估藥物有效性和毒性的篩查試驗,還可用于研究腫瘤行為、耐藥性以及癌細胞與其微環境之間的相互作用,此外,以治療為目的將球體向患者移植的研究也正在進行,且在缺血性疾病及肝病治療方面,球體的有效性已獲認可。
培養基:TSCM腫瘤干細胞成球培養基(啟達生物,P2401)
1. 球體培養無需支架,通過貼壁細胞趨向于聚集的特性形成細胞球體
2. 大部分腫瘤細胞株可直接使用TSCM成球
3. 可培養復雜的球體和類器官
4 .可維持同質腫瘤球的傳代和擴增
5 .無血清無直接動物源蛋白組分,可保持實驗的統一性和可驗證性。
