實驗步驟:
Day 1 .用包被液(啟達生物:SD0044)預鋪六孔板,500µL-1ml/孔,以底面全部浸沒為主,4℃過夜后,PBS 洗3遍,再用 1% BSA于37 ℃封閉1h,PBS清洗3遍;
Day 2.將培養好的細胞消化下來,用1ml完全培養基重懸細胞,用血球計數板計數,調整濃度為5*10^5cells/mL,分別接種于預鋪包被液的6孔板中,每個孔2*10^5cells,每組設3個復孔,每孔加1ml無抗培養基,37℃孵育1-8h(孵育時間以細胞正常培養時貼壁的速度參考);孵育時間到后,再使用PBS洗去未黏附的細胞。
檢測:
5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS洗3遍;0.1%的結晶紫染色,室溫靜止0.5 h,PBS洗3遍,每孔加入500μL 10%的乙酸,5~10 min后用酶標儀檢測595 nm的吸光度值,用以表示黏附細胞的多少。
可別小看了細胞粘附實驗,它無處不在,可用于藥物開發與篩選、腫瘤生物學研究、組織工程與再生醫學細胞間相互作用研究、疾病模型和病理研究、免疫學研究、細胞遷移與傷口愈合研究、血管生成研究等等。
相關產品:
SD0044細胞包被液
啟達生物的包被液,主要由纖連蛋白,明膠,和2種促細胞貼壁的基質組成:
1.它成分明確,使用簡單,無需配制和稀釋直接加入培養瓶,細胞接種面需全部浸沒后靜止4-5分鐘吸出晾至培養瓶表面干燥即可。
2.它包含多種組分不是單獨纖連蛋白和單獨的明膠溶液所能達到的效果滴。
3.它適合多種細胞和實驗,不需要您每養種細胞就要準備一種特殊的包被液。
