摘要
肺部疾病治療受血管內皮屏障限制，常規藥物遞送效率低。本研究構建雙特異抗體 833c&Freso，依托小窩蛋白介導跨內皮轉運，結合 SPECT/CT 分子影像活體示蹤。經 ¹²?I 標記后可精準靶向肺組織，實現超高富集（肺富集率高達83%），僅10 μg/kg劑量即可顯著抑制肺部炎癥與纖維化，較普通抗體（fresolimumab需3 mg/kg）藥效提升千倍以上，為肺部疾病精準靶向治療與分子影像評估提供新策略。
圖1：論文封面概要
方法
基因重組構建雙特異抗體 833c&Freso（一端靶向肺內皮小窩蛋白標志物APP2，一端中和TGF-β），體外驗證分子結合活性。建立博來霉素誘導大鼠急性肺損傷模型（單次氣管內滴注2 U/kg），將抗體進行 ¹²?I 放射性標記，設置對照抗體組（僅靶向的833c、僅治療性fresolimumab、突變體833cX&Freso）；通過尾靜脈給藥（1–30 μg/kg），設置不同時間點（預防性-1h或治療性第1/2天），結合 SPECT/CT 顯像、離體生物分布、炎癥因子檢測及組織病理染色評價靶向能力與治療效果。
分子影像設備應用
采用 美迪索 nanoScan SPECT/CT 小動物成像系統，設置 ¹²?I 特征能窗（>28.4 keV，寬度20%）采集；CT（50 kV，300 ms曝光）提供解剖定位與衰減校正，SPECT 經三維迭代重建。利用影像融合與感興趣區定量技術，動態檢測抗體在肺部及全身分布，計算靶向指數，實現活體無創可視化評估。
分子影像設備實驗結果
SPECT/CT 顯像顯示 833c&Freso 可特異性富集于損傷肺組織，1 小時內肺攝取達64 %ID/g，總劑量83%蓄積于肺；對照抗體無肺部靶向、僅滯留血液，肺組織靶向指數（TTI）相差百倍以上（833c&Freso TTI=117，其余<1）（圖 2）。
圖 2（原文 Fig.2）：SPECT/CT 融合顯像對比不同抗體肺部靶向富集差異
研究結果
833c&Freso 依托小窩蛋白轉運途徑突破血管屏障，肺部富集率可達 80%；微克級劑量（10 μg/kg）即可顯著降低炎癥細胞浸潤（總白細胞抑制54%，中性粒細胞57%），下調 IL-6（39%）、IL-1β（54%）等炎癥因子，減輕肺水腫與肺組織病理損傷，藥效遠高于普通單抗，且無明顯全身毒副作用（圖 3）。
圖 3（原文 Fig.3）：各組肺泡炎癥細胞定量對比，直觀體現抗體抗炎效果
研究結論
借助小窩（caveolae）介導主動遞送的雙特異抗體，可實現肺部精準靶向富集；SPECT/CT 分子影像能夠活體無創評價抗體靶向分布與治療效果。該策略突破傳統藥物遞送瓶頸，大幅降低有效治療劑量，為急性肺損傷、肺纖維化等肺部疾病的靶向診療與影像評估提供重要參考（圖 4）。
圖 4（原文 Fig.4）：肺組織病理染色，證實雙特異抗體可顯著減輕肺損傷程度
原文出處DOI：10.1371/journal.pone.0276462