系統性紅斑狼瘡(SLE)是以多種自身抗體、多系統受累為特征的自身免疫性疾病。SLE的發生是由于機體對自身抗原失去耐受，導致自身反應性B細胞的產生。這些B細胞分泌的自身抗體與自身抗原形成免疫復合物，引起炎癥和組織損傷，最終導致器官功能障礙。SLE最常見的并發癥是由免疫復合物介導的狼瘡性腎炎。目前，針對B細胞的治療策略對SLE患者有一定效果，但受限于分泌抗體的B細胞或漿細胞對消除治療的抵抗。因此，SLE中自身反應性B細胞的分化和維持的信號機制還不清楚。
2023年4月4日，中山大學附屬第一醫院張輝教授、楊念生教授團隊在Cell Metabolism上發表題為“Spleen
fibroblastic reticular cell-derived acetylcholine promotes lipid metabolism to
drive autoreactive B cell responses”的研究論文。
文章研究了脾臟網狀纖維細胞在系統性紅斑狼瘡（SLE）中自身反應性B細胞在免疫應答中的作用。研究發現，脾臟網狀纖維細胞分泌的乙酰膽堿能夠通過CD36受體促進B細胞的脂質攝取，從而增強B細胞的線粒體氧化磷酸化，提高B細胞的能量產生和分化能力。
證明了抑制脂肪酸氧化或者敲除B細胞中的CD36受體能夠減少自身反應性B細胞的產生和自身抗體的分泌，從而改善SLE小鼠的病情。本文揭示脾臟網狀纖維細胞通過乙酰膽堿介導的脂質代謝調節B細胞分化的新機制，為SLE的發病原因和治療靶點提供了新的線索。
實驗部分
脾臟的生發中心是在次級淋巴器官中的B細胞區（濾泡）內短暫形成的結構，成熟的B細胞在其中被激活、增殖、分化并突變其抗體基因。生發中心由多種細胞構成，包括B細胞、T輔助細胞和巨噬細胞等。由于脾臟生發中心的細胞構成復雜，切片形態結構呈現多種形態，在原位研究中，如何通過軟件算法精準定義其邊界，對生發中心大小數量進行定量研究的基礎。
本文使用TissueGnostics公司TissueFAXS Spectra全景多光譜組織掃描定量分析系統脾臟組織樣本進行多色熒光圖像采集。并且使用多重免疫熒光技術，通過AI Classifier技術獲得大量組織形態學信息，還結合了Tissue Cytometry技術中精準的聚集單細胞識別技術，通過定義多種細胞的相互密度關系，精確的識別到了脾臟生發中心的輪廓，并對FRCs及其分泌的乙酰膽堿影響下，對生發中心的增值和分化水平進行了精準定量。
Panel信息：B220 小鼠B細胞，CD3 T細胞，GP38 淋巴管內皮細胞，PNA 淋巴細胞成熟度
脾臟纖維網狀細胞（FRCs）通過膽堿能信號促進NZM2328小鼠的自身反應性B細胞。
為了進一步研究FRC來源的乙酰膽堿（Ach）在系統性紅斑狼瘡中的作用，對NZM2328小鼠進行了FRCs脾內注射(圖1A)。多重染色熒光樣本顯示，發現FRCs能夠增強生發中心（GC）反應，擴大GC的數量和大小，促進B細胞的分化和抗雙鏈DNA抗體的產生。
Fig 1 成纖維細胞網狀細胞通過乙酰膽堿促進NZM2328小鼠自身反應性B細胞
B：小鼠脾臟組織的MIF圖像(Gp38，綠色；B220，紅色；PNA，藍色)。
ACh增強NZM2328小鼠脂代謝和自身反應性B細胞反應
在NZM2328狼瘡小鼠的脾臟內注射了ACh，發現ACh能夠增加生發中心（GC）B細胞的鈣離子水平、脂質攝取和代謝、線粒體數量和氧耗率，從而促進GC B細胞和漿細胞（PCs）的分化。且發現ACh能夠增加抗雙鏈DNA抗體的產生，導致腎小球免疫復合物沉積、腎臟病理損傷和蛋白尿。
Fig 2 乙酰膽堿促進NZM2328小鼠脂肪酸代謝和自身反應性B細胞
(H)脾臟組織B220、CD3和PNA的MIF染色圖像。