主動(dòng)脈病變常見于心血管系統(tǒng)疾病或代謝類疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化、主動(dòng)脈夾層、肥胖癥、糖尿病、高血壓、瓣膜疾病、主動(dòng)脈瘤等，或介入類操作的并發(fā)癥。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為臨床診療的重要支撐，已經(jīng)得到全面而廣泛的應(yīng)用，而其中嚙齒類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)居各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)首位。嚙齒類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，常用的小鼠和大鼠品系選擇多，其有體型小、易于飼養(yǎng)管理、性情溫順、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)。然而實(shí)驗(yàn)鼠體型較小，其脈管系統(tǒng)也更微細(xì)，對實(shí)驗(yàn)鼠脈管系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)操作更考驗(yàn)實(shí)驗(yàn)人員的操作技術(shù)。
深圳靈賦拓普生物科技有限公司動(dòng)物技術(shù)團(tuán)隊(duì)在實(shí)驗(yàn)鼠全主動(dòng)脈取材方面擁有精湛的技術(shù)以及豐富的經(jīng)驗(yàn)，今天我們就來分享實(shí)驗(yàn)鼠全主動(dòng)脈如何取材。
實(shí)驗(yàn)鼠深度麻醉后，左心室灌注清洗和保護(hù)主要?jiǎng)用}血管，并剔除多余臟器，剪除胸腺暴露心耳和主動(dòng)脈弓；先分離頭臂干，然后自起始部離斷右鎖骨下動(dòng)脈，繼續(xù)向遠(yuǎn)心端分離右頸總動(dòng)脈至合適長度；之后依次分離左頸總動(dòng)脈和左鎖骨下動(dòng)脈至合適長度；后續(xù)延降主動(dòng)脈、胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈繼續(xù)分離血管，自起始部離斷肋間動(dòng)脈、支氣管支等分支血管，僅分離和保留左右腎動(dòng)脈合適長度，至分離出左右髂總動(dòng)脈合適長度結(jié)束。最后將已完全游離的血管，自右頸總動(dòng)脈開始依次離斷，獲得完整的主要?jiǎng)用}血管，迅速置于保存液中用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
成功獲取的實(shí)驗(yàn)鼠全主動(dòng)脈用途很廣。如動(dòng)脈粥樣硬化模型，主動(dòng)脈內(nèi)膜、肌層甚至外膜都有脂肪浸潤，可用大體油紅O染色方法對管壁脂肪進(jìn)行顯影染色，之后拍照、對油紅O染色區(qū)域進(jìn)行定量及統(tǒng)計(jì)分析。將取好的主動(dòng)脈進(jìn)行液氮速凍做冰凍切片，亦可做鏡下油紅O染色。本文提及的特殊染色，靈賦拓普均可提供染色區(qū)域定量分析及統(tǒng)計(jì)繪圖服務(wù)。
圖1 全主動(dòng)脈大體油紅O染色（內(nèi)壁面）
圖2 主動(dòng)脈瓣冰凍切片后油紅O染色
又如主動(dòng)脈夾層模型，由于取材前模型灌注僅能清除管內(nèi)血液，夾層內(nèi)的血液或血凝塊無法清除，取材后無需染色，肉眼即可看見夾層區(qū)域。同樣可進(jìn)行定量統(tǒng)計(jì)分析。
圖3 主動(dòng)脈夾層及對照樣本（A正常樣本，B病變樣本）
取好的主動(dòng)脈進(jìn)行福爾馬林固定，制成石蠟切片，還可以使用茜素紅染色和Von Kossa染色觀察主動(dòng)脈管壁鈣化程度。
圖4 茜素紅染色及Von Kossa染色對鈣鹽沉積的顯影作用
還可以取病變局部區(qū)域進(jìn)行常規(guī)分子實(shí)驗(yàn)，如蛋白電泳、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、組學(xué)檢測等等，可以說是“一管在手，Paper我有”了。
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