食源性病原微生物快速檢測技術是實現全產業鏈食品安全的重要手段。基于CRISPR-Cas系統的新一代分子檢測技術具有簡便、準確、快速的優點。近日來自中國農業科學院家禽研究所的龔建森博士團隊聯合揚州大學、復旦大學和美國奧本大學的研究人員通過將LAMP等溫擴增技術與CRISPR/Cas12b檢測系統相結合，成功構建了適合腸炎沙門氏菌的一步法LAMP-CRISPR/Cas12b快檢技術體系。該研究創新性地實現在一管內一步完成擴增加酶切反應，不僅突破了常規CRISPR檢測兩管開蓋或一管兩步的操作繁瑣性，而且可以有效規避交叉操作及氣溶膠污染對檢測結果的影響。相關研究成果發表于Food Control（中科院1區，IF:6）的題為“Rapid and accurate detection of Salmonella enterica serovar Enteritidis using a one-step LAMP-CRISPR/Cas12b method”。伯豪生物深度參與CRISPR檢測體系的搭建。
發表期刊：Food Control
影響因子：6
發表時間：2024.4
使用伯豪服務：CRISPR-Dx
檢測流程
從樣品中提取基因組DNA，直接加入預先配制工作溶液的反應管中進行檢測。當存在目標核酸序列時可采集到熒光信號，不存在目標核酸序列時檢測不到顯著信號。
腸炎沙門氏菌LAMP-CRISPR/Cas12b檢測系統工作流程示意圖
研究成果
腸炎沙門氏菌（S. Enteritidis）作為一種全球流行的食源性病原體構成了重大威脅。及時的診斷方法是有效管理腸炎沙門氏菌感染的必要條件。為了快速、準確、便捷地檢測腸炎沙門氏菌，研究人員建立了一步法LAMP-CRISPR/Cas12b檢測平臺，整個反應只需要45分鐘，不需要專門的設備，具有100%的特異性，達到了每個反應30個拷貝的檢測限。該檢測平臺對其他19種沙門氏菌血清型和9種非沙門氏菌致病菌具有100%的特異性，無交叉反應。與傳統培養的方法進行比較發現一步法LAMP-CRISPR/Cas12b平臺的腸炎沙門氏菌陽性率為2.88%（6/208），其中雞肉為3.14%（4/127），鴨肉為4.44%（2/45），豬肉為0.0%（0/36），與傳統培養方法的一致性為100%。該研究成果表明一步LAMP-CRISPR/Cas12b平臺用于腸炎沙門氏菌檢測的簡便性和準確性，不僅為腸炎沙門氏菌的檢測提供了一種簡單，快速且準確的技術手段，而且為其他食源性病原菌的快速檢測提供了新的解決方案，對于食品產業鏈的病原追溯，突發性食品安全事件的應急處置具有重要意義，在資源有限的多樣化環境中具有潛在的應用前景。
伯豪生物提供CRISPR診斷技術整體解決方案，適用于各種樣本類型，可應用于病原體檢測（細菌、病毒、真菌、寄生蟲等）、食品環境安全檢測、腫瘤早篩、遺傳病基因篩查、轉基因植物檢測等。結合您的研究領域，您只需提供靶標基因或者檢測的目標物種，伯豪生物為您定制個性化的全面的解決方案！
文獻鏈接：
https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2024.110534