空轉(zhuǎn)課堂-新鮮樣本:10X Genomics V1與V2該如何抉擇?-技術(shù)前沿-資訊-生物在線

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空轉(zhuǎn)課堂-新鮮樣本:10X Genomics V1與V2該如何抉擇?

作者:上海伯豪生物技術(shù)有限公司 暫無發(fā)布時間 (訪問量:19436)

10x Visium空間轉(zhuǎn)錄組已經(jīng)陪伴我們3年多的時間了。很多讀者也都在關(guān)注著技術(shù)的更新。22年末,10X發(fā)布了新鮮樣本空間轉(zhuǎn)錄組解決方案的V2版本,但新鮮樣本的V2版本是V1版本的升級嗎?二者有什么異同點?兩個版本間該如何選擇?在本文中都會找到答案。

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01

技術(shù)原理是否相同?

不,并不同。我們都知道10X Genomics 在19年推出第一版空間轉(zhuǎn)錄組解決方案時,應(yīng)用的技術(shù)是利用芯片上帶有Spatial barcode的探針去捕獲樣本中釋放的mRNA,構(gòu)建文庫后再通過測序,能夠獲得基因表達(dá)信息的同時,也能獲得基因表達(dá)的位置信息。

但新鮮樣本V2版本與V1版本的基本原理完全不同,V2版本設(shè)計了RNA模板連接 (RTL) 探針集,具有高敏感性和特異性,且探針集覆蓋了人和小鼠超過18000個基因,且90%以上基因設(shè)計了3個探針對,實驗利用探針雜交方式,獲取組織中基因信息。將組織中mRNA酶解后進(jìn)行組織透化從而釋放DNA探針與基因表達(dá)芯片上的探針雜交,構(gòu)建文庫后再通過測序,獲得基因表達(dá)信息。

圖?10X Genomics Visium探針雜交工作原理

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02

V1與V2版本有何異同點?

V2版本與V1版本相比,其質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)降低了較多,且無需前期透化實驗。

圖?10X Genomics Visium探針雜交工作原理

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03

V1與V2版本可上機(jī)的樣本類型有哪些?

圖?10X Genomics Visium新鮮樣本可上機(jī)的樣本類型

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04

V1與V2版本如何選擇?

? 人或小鼠樣本,可選擇V1或V2,但其他樣本類型只能選擇V1版本。

??因V2版本為固定基因探針,所以,如果想檢測更多基因信息,那么需要選擇V1版本。

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05

10X Genomics Visium項目經(jīng)驗

圖?FF空間轉(zhuǎn)錄組已完成實驗的樣本類型

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