細胞簡介
該細胞是從一名1歲的患有急性單核細胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細胞,細胞膜和胞漿內均沒有免疫球蛋白,表達C3R和FcR;可受佛波酯TPA誘導向單核系方向分化;可作為轉染宿主。

細胞信息
細胞名稱:Thp-1人單核細胞白血病
生長特性:懸浮、低密度容易聚團,高密度分散
倍增時間:60-70 小時 (PubMed= 6970727 ); 26 小時 (PubMed= 25984343 ); ~35-50 小時 (DSMZ=ACC-16)
換液頻次:2~3次/周
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視實際細胞量決定)細胞密度在8X106/ml 進行傳代,不要超過1X106/ml
培養基推薦配方 :RPMI-1640(中喬新舟 貨號:ZQ-200)+10%胎牛血清(中喬新舟 貨號:ZQ0500)+1%雙抗(中喬新舟 貨號:CSP006)+β-Mer 終濃度:0.05mM(中喬新舟 貨號:CSP005,例:500ml添加500ul)
β-Mer(巰基乙醇)的作用:β-巰基乙醇是一種常用的培養補充劑,有抗氧化的作用,可減少氧化應激對THP-1細胞的影響。當細胞密度過大但需要維持時,可適當增加巰基乙醇的比例(不超過標準量的1.5倍)。
(該圖片引用ATCC細胞培養參考圖)
THP-1細胞復蘇
THP-1細胞復蘇后通常需要3-5天恢復狀態,細胞對密度有一定依賴性,如果復蘇時離心去除了凍存液,建議復蘇后48小時內不要進行操作。密度低時細胞會抱團生長屬于細胞快速增殖生長的一個階段,是正常情況。
THP-1細胞的傳代
A、THP-1細胞為懸浮細胞且具有低密度依賴性,當細胞密度達到8×105個活細胞/ mL時需要進行傳代。細胞密度不要超過1×106活細胞/ mL。
B、比例一般為1:2-4,可以分瓶后補充培養液,不需要離心,t25培養瓶分瓶后補充新鮮完全培養基到7ml,
C、如果對懸浮細胞密度把控不好,最佳的方式是進行細胞計數。
D、培養一周左右可以離心一次,以去除一些死細胞。
( 中喬新舟出庫細胞圖4X ,該圖片室溫放置5min拍照,該密度可進行傳代,細胞計數密度為1.2X106/ml)
THP-1細胞的凍存
A、用10%DMSO:900ul FBS + 100ul DMSO (有毒小心操作)或直接用無血清細胞凍存液。
B、收集生長狀態較好的細胞于15 mL離心管中,調整細胞濃度至細胞數量大約200萬-300萬/mL凍存液為宜。
C、根據情況放入-80℃培養箱最多放置3個月,盡快轉移到液氮中進行長期保存。
THP-1培養常見問題
1、THP-1細胞在培養過程中細胞發生聚團怎么辦?
少量細胞聚團,呈葡萄串狀,屬于正常現象,特別是細胞密度較低時,易出現這種情況。密度高時,細胞會自然分散開,如果密度高聚團還是很嚴重,通過觀察細胞狀態、巰基乙醇添加量、或更換血清品牌或增大血清比例(不超過20%)有助于解決聚團問題。
2、THP-1細胞在培養過程中細胞發生貼壁怎么辦?
(中喬新舟細胞客戶咨詢圖)
2.1 THP-1細胞培養過程中出現少量細胞貼壁屬于正常情況,不需要擔心??梢暂p吹收集細胞或者丟棄貼壁部分細胞。
2.2 但如果當貼壁細胞比例高于20%,說明細胞生長環境有異常,這時候就需要排查培養箱溫度及CO2濃度、培養基成分以及培養器皿是否異常。可用非TC處理過的培養瓶,不利于細胞貼壁。
3、THP-1復蘇不起來怎么辦?
3.1 該細胞凍存后復蘇率較低,凍存時請酌情提高細胞量,凍存時活細胞密度不能低于100萬-300萬/mL,同時復蘇密度也有依賴性,細胞復蘇后需要培養3-5天狀態才能恢復,如有細胞碎片,待細胞密度增大后通過低速離心去除。
3.2該細胞為懸浮細胞,在培養時更喜歡溫和處理,細胞密度低時,培養時盡量少對細胞進行離心處理以此造成對細胞的傷害。換液時不要全培養基更換。
3.3 THP-1細胞中需要添加β-巰基乙醇,現用現配,不可直接添加至完培中長期儲存,會影響β-巰基乙醇的穩定性。
THP-1培養細節你都了解嗎?
作者:上海中喬新舟生物科技有限公司 2025-02-25T00:00 (訪問量:35269)
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