2025年12月23日，沙礫生物新一代基因敲除型腫瘤浸潤淋巴細胞（Tumor-Infiltrating Lymphocytes,TIL）產品GT307注射液獲FDA IND批準。GT307是一款基于CRISPR基因編輯技術的下一代雙基因敲除型TIL產品，旨在解決傳統TIL在腫瘤微環境中易發生功能耗竭、持續性不足等關鍵瓶頸問題。該項目選擇了高保真CRISPR/AaCas12b^Max編輯器，標志著這一類具備“0脫靶”特性的基因編輯工具，正在從研究端走向臨床端。

在基因與細胞治療領域，監管對脫靶風險、編輯一致性及原材料的合規性一貫高度關注，這也是近年IND批準審核中的關鍵技術考量。這意味著編輯工具本身是否具備“臨床可用能力”，正在直接影響項目推進。在這一背景下，近岸蛋白完成臨床級“0脫靶”基因編輯器AaCas12b^Max的FDA DMF備案（DMF No.041711），成為行業中少數可被IND/NDA直接關聯引用的編輯工具之一。DMF文件系統性覆蓋產品特性、分析方法、生產工藝及關鍵質量控制點，可通過授權信機制，支持中美雙報客戶加速注冊申報。

Cas12b（C2C1）源自酸性脂環酸芽孢桿菌（Alicyclobacillus acidiphilus），其對sgRNA spacer的堿基錯配容忍度極低，在人和小鼠細胞中幾乎不容忍任何單個mismatch。這一特征使得Cas12b系統具有極高的編輯位點保真性，潛在脫靶編輯位點和脫靶編輯概率均遠低于Cas9和Cas12a，顯著提高基因編輯安全性，對標安全性要求極高的臨床應用場景。

Cas12b天然具有“0脫靶”效應^[1]

基于unbiased分析的潛在脫靶位點，AaCas12b^Max系統具有遠低于Cas9的潛在脫靶位點和染色體易位風險

通過MIDAS蛋白工程化體系改造，AaCas12b^Max在保留天然“0脫靶”特性的同時，編輯效率已提升至可媲美Cas9的水平。這也是其已被應用于近30個KO靶點臨床轉化研發管線的關鍵原因。

AaCas12b^Max系統在各類體外細胞系以及原代細胞中（T細胞、干細胞等），均表現出優秀的編輯效率（＞90%）。

值得注意的是，在沙礫生物AaCas12b^Max編輯后的TIL產品中，細胞擴增能力和細胞存活能力得到顯著的提高，TIL擴增后產生的總細胞數增加了3-5倍。更進一步地，這些AaCas12b^Max編輯后的TIL產品表現出更高的細胞干性、更低的耗竭特征和凋亡率、以及在體內回輸后更強的擴增能力。這表明，相對于傳統SpCas9系統基因編輯會對TIL產品造成應激損傷，AaCas12b^Max編輯損傷更小、編輯后的TIL產品能夠具有更好的細胞狀態。RNA-seq組學研究進一步發現，AaCas12b^Max編輯后T細胞產品的DNA修復速度更快，同時細胞凋亡低于SpCas9^[2]。

AaCas12b^Max在體外編輯應用中具有與Cas9幾乎相同水平的敲除效率和遠低于Cas9的脫靶效應。

與Cas9復雜且昂貴的國際專利網絡不同，AaCas12b^Max擁有清晰、可控的底層與應用層專利體系：

• 底層專利已在中、美、日等多國授權

• 天澤云泰擁有基因與細胞治療領域授權，近岸蛋白獲得AaCas12b^MaxGMP級和RUO級蛋白的生產和市場推廣銷售許可。

• 避免多重專利許可疊加帶來的不確定性和高成本

這使基于AaCas12b^Max的基因與細胞療法在全球化布局與長期商業化上具備明顯優勢。

隨著基因與細胞治療的不斷發展，編輯工具的選擇，已不再只是效率之爭，而是安全性、合規性與長期可持續性的綜合判斷。AaCas12b^Max正在成為下一個臨床級基因編輯器之一。

參考文獻

[1]Teng, F., et al., Repurposing CRISPR-Cas12b for mammalian genome engineering. Cell discovery, 2018. 4(1): p. 63.

[2]沙礫生物官方公眾號