技術介紹 | UHPLC-QTOF-MS非靶標代謝組學-技術前沿-資訊-生物在線

技術介紹 | UHPLC-QTOF-MS非靶標代謝組學

作者:上海阿趣生物科技有限公司 2022-01-12T16:12 (訪問量:9443)


通過液質聯用(LC-MS)方法檢測生物體受外界刺激前后體內大多數小分子代謝物的動態變化,重點尋找在實驗組和對照組中有顯著變化的代謝物,進而研究這些代謝物與生理病理變化的相關關系,其研究對象大都是分子量1500Da以內的小分子物質。

技術優勢

? 較高的靈敏度、分辨率

? 較寬的動態范圍

? 適合于生物樣本中復雜代謝產物的檢測和潛在標志物的鑒定

? 適合對標本中未知代謝物的探索研究

? 定性準:6D質控體系

技術路線

技術參數

樣本要求

血清、血漿:200 μL/sample

尿液:1 mL/sample

組織:200 mg/sample

糞便、腸道內容物:200 mg/sample

細胞、微生物:1X 107 cells/sample

培養液:200 μL/sample


生物學重復

樣本數量:植物和微生物n≥6,動物樣本n≥10,臨床樣本n≥30,所有重復樣本獨立分析

其他種類的樣品在收集之前請聯系我司銷售工程師


檢測平臺

UHPLC-QTOF-MS(Agilent 1290 UHPLC-Agilent 6550/SCIEX 6600)


常規項目周期

45個自然日,含基礎數據分析(從收到客戶預付款并收到樣品之日起)


應用方向

? 表型和生理功能研究

? 疾病病理研究

? 臨床診斷及治療

? 藥物研究

? 中醫理論研究

? 食品科學與營養學研究

? 畜牧與農林業研究

? 環境毒理研究



案例分析


標題:膳食膽固醇通過調節腸道微生物群和代謝物驅動脂肪肝相關肝癌

研究對象: 小鼠

期刊: Gut

影響因子: 19.819

時間: 2020年


研究背景

非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD)是全世界日趨普遍的慢性肝病。隨著肥胖和代謝綜合征在全球的流 行,近20年亞洲國家NAFLD增長迅速,在上海、北京、廣州和香港等地區成人NAFLD患病率約在30% 左右。NAFLD可進展為非酒精性脂肪性肝炎, 進而發展為肝硬化甚至肝癌。NAFLD相關肝癌的發病率在 過去10年增加了4倍,相應的醫療保健費用也在逐步增加。


研究結果

發現了長期的高膽固醇飲食,會通過調節腸道菌群來誘導小鼠NAFLD-HCC形成和發展。膽固醇通過腸道菌群的變化使TCA升高、IPA降低,促進脂質積累和肝細胞增殖,從而導致NAFLD-HCC的發展。而通過降膽固醇治療,可以阻止高膽固醇飲食誘導的NAFLD-HCC。這意味著,調控膽固醇和腸道菌群及其相關代謝產物可能為以后預防NAFLD-HCC提供有效策略。


研究思路

結果展示

膳食膽固醇含量與血清代謝物有顯著差異(圖A)。膽酸生物合成是高膽飲食的小鼠改變的關鍵途徑(圖B)。在HFHC喂養的小鼠中,初級膽汁酸包括?;侨┠懰?TCA)、?;侨┟撗跄懰?TUDCA)、糖膽酸(GCA)和?;侨┟撗跄懰?TCDCA)等小鼠的代謝物異常上調(圖C)。在微生物色氨酸代謝中,3-惰基丙酸(IPA)是一種HFHC喂養的小鼠中異常下調的代謝物(圖C)。與HFLC喂養的小鼠相比,HFHC喂養的小鼠血清脂多糖(LPS)濃度升高,結腸e-鈣粘蛋白丟失(圖D),表明膳食膽固醇可能損害腸道屏障功能。進行了相關性分析,確定了HFHC改變的微生物和代謝物之間的潛在關聯(圖E)。


LC-MS非靶代謝組學分析血清代謝譜

參考文獻

Xiang Zhang, et al. Dietary cholesterol drives fatty liver- associated liver cancer by modulating gut microbiota and metabolites[J]. Gut ,2020.


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