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間標磁珠——輕松分選任意細胞

作者:杭州聯科生物技術股份有限公司 2014-10-13T23:19 (訪問量:5644)

我們知道,做細胞分選,首先要知道目的細胞與其它細胞相比,有什么特別的標志,如常用的細胞表面CD marker,最簡單的方法是選擇直接耦聯相應抗體的磁珠,即所謂的直標微珠,如用CD4 microbeads來直接分選CD4 + T細胞。
但是,美天旎的直標磁珠多是針對小鼠、大鼠、人和靈長類的,針對其它物種的直標磁珠我們還在不斷研發中,又或者您關注的細胞類型較新,我們沒有相應磁珠時,我們還有沒有辦法用磁珠分選呢?答案是肯定的,美天旎有多種間標微珠可供選擇,利用間標微珠,幾乎可以分選任何物種的任意類型的細胞,只要目的細胞有特定的標志和有相應的一抗,我們就可以對其進行磁性分選。
那么,美天旎的間標微珠有哪些呢?

http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/8XkUZCSyypfj7PpwgokcHUeiclqIcb2bBpPibXuGnliaJRkBHHqmNbTuic38WicMp3bek2lKibtwZia3pTKOB8bT8SxjA/0
Anti-FluorochromeMicroBeads:即抗熒光素微珠

此類微珠上耦聯了熒光素,如FITC、PE、APC、Cy5、Cy7等。
如圖1:從人PBMC中分選CMV特異性T細胞,用PE標記的CMVpp65/A2四聚體標記CMV特異性T細胞,再用抗PE微珠將其從PBMC中陽性分選出來,本次分選過兩個MS柱。

http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/8XkUZCSyypeNibMmHd85pEUKqaknqVbghCrQrziaIrDvm2uE41O9iaZkxVvWs3DXwkpA8oHry04DjwyjKxAIzgJng/0
Anti-BiotinMicroBeads和Streptavidin MicroBeads

二者均可以捕獲生物素耦聯的一抗所結合的細胞、生物大分子等,其區別在于:前者只識別耦聯了抗體和細胞的生物素,不會結合溶液中游離的生物素,而后者會識別游離生物素,因此,如果待分選細胞懸液中存在游離生物素,則最好選擇Anti-Biotin MicroBeads。
如圖2:先用CD3-Biotin標記人PBMC中的CD3+細胞,再用Anti-Biotin MicroBeads進行陽性分選,過一次MS柱。

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Anti-Ig MicroBeads

適用于分選由無熒光素標記的一抗所標記的細胞,如Anti-Mouse IgM MicroBeads,可用于分選小鼠IgM型一抗識別的細胞。
如圖3:用CD16(mouse IgM型)一抗來標記人外周血淋巴細胞,然后用Anti-Mouse IgM MicroBeads進行陽性分選,過一次MS柱。
因此,不夸張的說,結合直標磁珠和間標磁珠,我們幾乎可以分選任何物種中任意類型的細胞。

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