流式胞內染色步驟
(使用FIX & PERM固定破膜)
制備好細胞懸液,取100ul
(全血樣本:人100ul,小鼠30~50ul)
染表面抗體,室溫避光孵育15min,不用洗滌
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加入FIX&PERM Reagent A 100ul室溫孵育15min
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加入3ml流式染色緩沖液(Flow Cytometry Staining Buffer)
300g 離心5min 棄上清收集細胞
液體盡量倒干凈,不要殘留
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渦旋混勻沉淀,加入FIX&PERM Reagent B
100ul和胞內抗體
(同型對照管加入同等劑量的抗體)
混勻,室溫避光孵育20min
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加入3ml流式染色緩沖液,300g離心5min棄上清收集細胞
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用0.5ml 流式染色緩沖液重懸后立即上機。
或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小時內上機分析
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| 廠商 | 目錄號 | 產品名稱 | 規格 |
| MultiSciences | 70-S1001 | Flow cytometry Staining buffer | 125ml |
| MultiSciences | 70-F0001 | 多聚甲醛溶液,4% | 100mL |
| MultiSciences | 70-GAS003 | FIX&PERM Kit | 50T |
| MultiSciences | 70-GAS005 | FIX&PERM Kit | 100T |
| MultiSciences | 70-GAS006 | FIX&PERM Kit | 200T |
| MultiSciences | 70-GAS008 | FIX&PERM Kit | 1000T |

