你是否曾好奇，那些深受特異性皮炎困擾的患者，背后的疾病機制是怎樣被研究的呢？今天就帶大家走進特異性皮炎動物模型研究的世界。

一、前言：

特異性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一種慢性炎癥性免疫介導的皮膚病。其主要特征為皮膚增厚、色素沉著、表面粗糙，并且伴有明顯的瘙癢癥狀。該病癥與遺傳、免疫異常、環境因素以及皮膚屏障功能異常等多種因素相關。它具有病因復雜、發病率高、病程長、易復發且難以治愈等特點，嚴重影響著患者的生活質量。

許多研究報告指出，2,4 - 二硝基氟苯（DNFB）是一種半抗原，能夠通過刺激表皮引發動物出現 AD 樣皮膚病變 [1]。例如，Nam 等人就利用 DNFB 誘導的特應性癥狀動物模型，研究了訶子提取物的治療效果 [2]。盡管目前在 AD 的免疫學研究方面已經取得了重大進展，然而該疾病的發病機制仍然尚未完全明確。

二、模型構建：

選取 5 周齡的 SD 大鼠，在造模前 1 天對其背部進行脫毛處理。脫毛后的第 1 天、第 2 天和第 3 天，分別在大鼠背部外涂 375μL 1% DNFB 和丙酮 / 橄欖油（3:1）混合液各一次，以此進行致敏。從第 7 天開始，每隔 1 天涂抹 262.5μL 1% DNFB 進行激發，直至第 29 天評分，造模結束。對照組則涂抹丙酮 / 橄欖油（3:1）溶液，涂抹的時間和劑量均與模型組保持相同。具體的造模流程如圖 1 所示：

圖1 大鼠AD模型造模流程

三、大鼠造模過程中皮膚情況展示

在造模過程中，大鼠的皮膚變化情況如圖 2 所示：

圖2 AD模型大鼠皮膚情況展示

四、模型評價：

1、臨床癥狀評分：根據皮膚紅腫、紅斑、滲出，丘疹、丘皰疹、水皰、糜爛等濕疹樣皮損表現進行評分，具體的評分標準如下表1所示，評分結果如圖3所示：

表1 臨床癥狀評分（EASI評分法）

圖3  AD模型大鼠評分結果

分析：在Day29時評分結果顯示，與Control相比，Model組評分顯著增加，P＜0.0001。

2、病理分析：

圖4  AD模型大鼠皮膚組織病理染色結果

分析：在 Day46 時，取皮損處的皮膚組織進行 HE 染色，結果顯示，Control 組大鼠的皮膚組織結構規則，包含表皮、真皮、皮下組織以及較多的皮膚附屬器結構，另外還可見皮膚下的橫紋肌組織；而 Model 組大鼠的皮膚組織結構稍顯紊亂，表皮呈現輕度增厚并伴有輕度角化過度，真皮層纖維組織增生，同時伴有較多炎細胞浸潤，部分區域的皮膚附屬器結構消失，皮下組織層變薄，同樣可見皮膚下的橫紋肌組織。并且，Model 組的皮膚厚度（如圖 4 紅線標注）明顯高于 Control 組。

3、測量皮炎面積：

圖5 AD模型大鼠皮炎面積統計和測量方法[3]

分析：研究顯示 [3]，在 Day7 時，皮炎面積達到峰值。隨著激發次數的增加，DNFB 模型組大鼠的皮炎面積逐漸趨于平穩。在 Day28 時，與 Control 組相比，DNFB 模型組大鼠的皮炎面積顯著上升，P＜0.0001。

參考文獻：

[1] Heo J C, Son H U, Kim S L, et al. A derivative of L-allo threonine alleviates 2,4-dinitrofluorobenzene-induced atopic dermatitis indications.[J].Journal of the Agricultural Chemical Society of Japan, 2012, 76(11):2021-2025.

[2]Lee,Sang-Han.Mitigation of 2,4-dinitrofluorobenzene-induced atopic dermatitis-related symptoms by Terminalia chebula Retzius.[J].International Journal of Molecular Medicine, 2011, 28(6).

[3]Xuesong, Yang,Zhimin, Wang,Hong, Huang et al. Jianpi Yangxue Qufeng compound alleviates atopic dermatitis via TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway.[J] .Heliyon, 2024, 10: 0.