簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是通過(guò)腰穿把藥物直接注射到脊髓周?chē)那誓ぃX脊液循環(huán)系統(tǒng))中,讓藥物隨腦脊液快速擴(kuò)散,直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。
? 優(yōu)勢(shì):避開(kāi)血腦屏障,藥物起效快、局部濃度高,是研究神經(jīng)系統(tǒng)疾病的 “黃金手段”。
# 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
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小鼠:成年鼠,體重 18-25g(太輕易損傷,太重定位難)
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大鼠:成年鼠,體重 200-300g(體型適中,操作穩(wěn)定性高)
? 必備工具:
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剃毛器(備皮超重要!)、碘伏(消毒 3 遍!)、加熱墊(維持體溫,防低溫應(yīng)激)
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微量注射器(30G-33G 針頭,細(xì)針減少組織損傷)
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麻醉劑:異氟烷(推薦!氣麻可控性強(qiáng),蘇醒快)
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誘導(dǎo)期:3-5% 異氟烷(快速麻醉,避免動(dòng)物掙扎)
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維持期:1-2% 異氟烷(保持淺麻醉狀態(tài),防呼吸抑制)
?? 關(guān)鍵:全程監(jiān)測(cè)呼吸頻率,避免麻醉過(guò)深!
俯臥位,四肢展固定,脊柱自然彎曲。
(重點(diǎn)!L5-L6 間隙定位更清晰)
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小鼠:直接剃毛;
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大鼠:可剪開(kāi)背部皮膚(約 1cm 小口,暴露脊柱)
碘伏以注射點(diǎn)為中心,由內(nèi)向外環(huán)形消毒 3 次。
定位標(biāo)志:髂嵴連線稍上方的 L5-L6 間隙(用鑷子輕戳,觸感凹陷處;大鼠可觸摸棘突,兩棘突間凹陷即為穿刺點(diǎn))
?? 小技巧:輕輕提拉尾巴,間隙會(huì)更明顯!

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針頭垂直刺入,突破黃韌帶時(shí)會(huì)有 “落空感”,同時(shí)鼠尾可能擺動(dòng)(成功信號(hào)!)
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注射量:小鼠≤10μl,大鼠≤30μl(速度要慢!過(guò)快導(dǎo)致腦脊液壓力驟升)
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拔針:停留 3 秒再緩慢拔出,防藥物反流。
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大鼠剪皮注射者:縫合皮膚(4-0 縫線),碘伏二次消毒
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放置加熱墊:等待蘇醒,維持體溫 37℃左右
進(jìn)針過(guò)深損傷脊髓,可能導(dǎo)致后肢癱瘓!務(wù)必確認(rèn) L5-L6 間隙,避免刺入 L4 以下。
所有器械高溫滅菌,消毒范圍≥5cm,術(shù)后觀察 3 天有無(wú)紅腫化膿。
異氟烷維持期不超過(guò) 2%,呼吸頻率<80 次 / 分需警惕,立即降低濃度 + 輔助通氣。
推注時(shí)間≥10 秒,勻速給藥,避免引起動(dòng)物劇烈應(yīng)激反應(yīng)。
蘇醒后觀察 30 分鐘:站立不穩(wěn)?后肢無(wú)力?立即記錄,嚴(yán)重者需安樂(lè)死(避免痛苦)。

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定位準(zhǔn)、麻醉穩(wěn),
消毒三遍別偷懶;
慢推慢注防反流,
術(shù)后觀察要耐心。
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本文僅供科研操作參考,具體實(shí)驗(yàn)需遵循動(dòng)物倫理規(guī)范,建議在專(zhuān)業(yè)人員指導(dǎo)下進(jìn)行。
作者 | 韋如月
編輯 | 翁小云
統(tǒng)籌制作 | 深圳靈賦拓普生物科技有限公司
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深圳靈賦拓普生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱(chēng)靈賦拓普)成立于2015年,是一家專(zhuān)注動(dòng)物科研,服務(wù)臨床前研究與評(píng)價(jià)的創(chuàng)新型CRO企業(yè)。公司以動(dòng)物模型為核心,同時(shí)開(kāi)展細(xì)胞、病理、蛋白、分子、生化、行為學(xué)等一站式服務(wù),賦能生命科學(xué)和生物醫(yī)藥研究。靈賦拓普在深圳南山、光明、坪山及廣州擁有研發(fā)基地及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,提供醫(yī)療器械評(píng)價(jià)、大小動(dòng)物模型開(kāi)發(fā)、藥物篩選與評(píng)價(jià)、動(dòng)物飼養(yǎng)等臨床前CRO服務(wù)。先后獲得國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)、專(zhuān)精特新企業(yè)、質(zhì)量管理體系等榮譽(yù)認(rèn)證。公司具有核心研發(fā)和專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì),致力于成為全國(guó)動(dòng)物科研服務(wù)領(lǐng)跑品牌,實(shí)現(xiàn)“愿天下沒(méi)有難治的疾病”的美好愿景。
