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動物脫毛模型:醫療美容研究之不長發那些事兒

作者:深圳靈賦拓普生物科技有限公司 2024-10-16T00:00 (訪問量:48313)

毛發生長是一個復雜的過程,受遺傳、營養、環境等因素的影響。脫發是一種遺傳因素、自身免疫性疾病、壓力和營養失衡等引起的毛發再生障礙,不僅影響容貌,而且會使患者產生焦慮、自卑等不良心理。隨著脫發人數的增加,脫發已成為當今社會最常見的健康問題。頭發生長周期包括三個階段:生長期、退行期和休止期。毛發生長障礙主要原因是毛囊循環的改變,即生長期縮短和休止期延長。因此,調控毛囊的生長周期在改善脫發和促進毛發再生中至關重要。

一、為什么要進行動物脫毛

1、動物靜脈注射或抽取血液

2、用于制備動物脫毛模型

二、動物被毛去除方法優缺點集合

方法

優缺點

拔毛法

主要適用于家兔耳緣靜脈注射或采血用,不適用于動物其他部位的去毛。

剪毛法

如果操作不當例如用手捉著動物皮毛剪,易剪傷動物皮膚,影響下一步實驗。剪毛法的一個最大的弊端就是剪下的被毛可到處亂飛,易導致實驗室的污染。

剃毛法

用剃毛刀剃毛也容易造成動物皮膚的損傷和感染。

脫毛膏脫毛

對動物皮膚刺激性小,脫毛后7 d內觀察幾種動物均無皮膚充血和炎癥反應等現象。

三、常見的動物脫毛模型方法及作用機理

1、松香石蠟拔毛模型:將松香和石蠟融化后按照1 ∶ 1的比例混合,置于室溫適當降溫,防止燙傷小鼠皮膚。將松香石蠟混合物均勻涂在小鼠背部,其熱量有利于擴張毛囊以利于毛發脫離,待混合物變硬后撕除,可觀察到脫毛后的小鼠背部皮膚呈粉紅色。該方法操作簡單,耗時短。適用于評價毛發生長情況、毛發生長期的研究。

 HE病理觀察毛囊情況:在第 7 天時,模型組的毛囊大部分仍處于休止期,其毛囊形態較小,位置較淺; 在第 14 天時,毛囊均處于生長期,模型組黑色素分泌較少,顏色較淡;在第 21 天時,模型組毛囊開始退化,形態上變短且細小。

毛發生長情況評估在實驗第 0天拔毛后,小鼠的背部皮膚顏色為粉色,毛囊同步進入休止期。在實驗期間,可觀察到和脫毛區域周圍原生毛發顏色相比,小鼠新生毛發顏色較黑。

2、脫毛膏脫毛模型:將小鼠背部毛發用電動剃毛器剔除后,均勻涂抹脫毛膏,面積約為 2 cm × 2 cm。放置 2 min 后,輕輕用脫脂棉擦去皮膚表面的脫毛膏,并用溫水清洗干凈。利用其化學物質軟化并毀斷構成毛發的角質蛋白分子鏈,從而切斷毛發纖維,使毛發脫除。需要注意的是:1次可能會有脫不干凈的情況,需要重復操作。

HE病理觀察毛囊情況:8 周齡小鼠毛囊大部分處于休止期,此時的毛囊下段退化,毛乳頭上移至立毛肌附著處。給藥 6 d后,給藥組小鼠毛囊向下生長至皮下深層,進入生長期,而 PBS 組仍停滯在真皮層;給藥 12 d 后,黑色素囤積,小鼠皮膚毛囊數增多,給藥組毛囊數量明顯多于 PBS 組。

毛發生長情況評估在造模完成后立即對小鼠背部進行拍照,此后每 48 h 進行拍照。各組脫毛后,皮膚均呈粉紅色,毛發進入休止期。給藥 6 d 后,給藥組開始變黑;給藥 8 d 后,給藥組明顯變黑而 PBS 組還呈粉紅色;給藥 12 d 后,給藥組均長出 1 層細密的毛發,而對照組僅部分區域長出毛發。

3、雄激素性脫發模型:利用小動物剃毛器將小鼠背部毛發剃短,并涂抹脫毛膏使殘余的毛發脫除,當小鼠皮膚呈粉紅色且無破損時,即可確認其毛囊處于休止期。后以 5 mg/kg的劑量用bing酸睪酮稀釋液于小鼠背部脫毛區域進行皮下多點注射,1 次/d,連續注射 60 d 造模。細胞質中有5α-還原酶能將睪酮轉化為二氫睪酮(DHT),其作用較睪酮強5倍。DHT進入細胞核,對代謝系統產生作用,影響毛發蛋白合成,致使毛母質細胞失去活力,開始角質化,發展為休止期毛發,最終毛發脫落。另外,DHT對毛囊產生毒性作用,使毛囊逐漸萎縮,導致毛發生長周期縮短,加速脫發的進程。該模型的脫毛具有可逆性,適用于脫發機制的研究。

HE病理觀察毛囊情況:與空白組(未注射bing酸睪酮)比較,模型組小鼠單位面積皮膚組織中含黑色素毛囊數量與總毛囊數量比值顯著降低。

毛發生長情況評估與空白組(未注射丙suan睪酮)比較,模型組小鼠新生毛發面積在脫毛區域中的占比和新生毛發的長度及重量均顯著降低,表明皮下注射丙suan睪酮導致小鼠出現毛發脫落的現象,且小鼠毛長及毛重降低。

當然除了上述常見的脫毛模型,還有1、背部涂抹咪喹莫特構建免疫調節劑脫發模型,與人類斑禿相似性較大,方法簡單、可靠,重復性好,成本低廉;2、18個月齡C3H/HeJ小鼠和3-4月齡DEBR大鼠自發性脫發模型,與人體自然衰老所引起的脫發機制最為接近;3、應用環磷酰胺腹腔注射,通過誘導生長期毛囊營養不良性改變或造成更嚴重的損害,使毛囊過早地向退行期改變,建立化療脫發(CIA)模型,該模型適用于化療藥物引起的脫發病理生理學機制以及實驗藥物治療學研究。在實驗研究過程中我們可以從藥物作用機理出發,選擇對應的動物脫毛模型,從而達到高效準確的研究成果。

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