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ELISA（酶聯免疫吸附劑測定）是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法，樣本的處理對于ELISA實驗的成功有著舉足輕重的作用。 利用ELISA進行檢測的樣本類型包括常見的血液（血清、血漿），組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到
ELISA實驗的結果。

下面就常見ELISA組織樣本處理方法的整理，希望對您有所幫助。
組織樣本一般是制成組織勻漿，處理方法如下:
1）取適量組織塊，于預冷PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿） ；

2）可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入 5-10ml預冷PBS(組織與 PBS 的質量體積比建議為 1:5，即1g 樣本加入 5ml PBS)進行充分研磨（有條件實驗室可選用機器勻漿），該過程需在冰上進行；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復凍融法可重復 2 次） 。

3）將制備好的勻漿液于5000×g 離心 5分鐘，留取上清即可檢測。

4）如果樣本需要長期保存，請?zhí)砑拥鞍酌敢种苿８鶕嶒炐枰M織勻漿樣本可先定量總蛋白，以便于統計分析數據。某些組織樣本如肝臟，腎臟，腦組織會有假陽性反應。

處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程，由于蛋白容易變性，降解，故該過程應盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要，尤其注意不要反復凍融，樣本處理之后可分裝密封保存， 4 度保存應小于 1 周，-20 度不應超過 1 個月，-80度不應超過2個月。在標本使用前應緩慢均衡至室溫，不應加熱使之融解。樣本的處理是實驗成功的第一步, ，以上就是關于常見樣本處理方法的一個簡述，供研究者參考.

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PMSF，英文全稱為Phenylmethanesulfonyl fluoride，也稱為Phenylmethylsulfonyl fluoride或α-Toluenesulfonyl fluoride。PMSF是常用的蛋白酶抑制劑，可抑制絲氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、凝血酶)和巰基蛋白酶(如木瓜蛋白酶)。工作濃度通常為0.1~1mM(即17~174μg/ml)。PMSF在水液體溶液中不穩(wěn)定，30分鐘就會降解一半，必須在每一次分離和純化步驟中加入新鮮的PMSF，樣品處理超過1h，補加一次(見水分解，使用前加入)。

PMSF 結構式：

蛋白定量試劑盒

BCA(bicinchoninic acid)蛋白定量：檢測的原理是Cu2+在堿性的條件下，被蛋白質成Cu+，Cu+和BCA相互作用形成紫色的反應復合物，可在562 nm處顯示強烈的吸光值，并與蛋白濃度在一定范圍內呈現良好的線性關系。

抗干擾Lowry法蛋白定量：其顯色原理與雙縮脲方法相同，只是加入了第二種試劑，即Folin-酚試劑，以增加顯色量從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。在堿性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。Folin-酚試劑中的磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和氨酸殘基還原，產生深藍色(鉬蘭和鎢蘭的混合物)。在一定的條件下，藍色深度與蛋白的量成正相關。聯科生物對常規(guī)Lowry法進行了改進，既能保證Lowry檢測法的準確性，又適用于各種含有干擾物質溶液的蛋白質定量測定。