
我們實驗中,標本中大多數神經激素、肽類物質,以及蛋白質為水溶性,在用于研究之前,常需固定,即使其凝固以降低其水溶性。甲醛能與蛋白質的氨基反應,使蛋白質凝固,因此在醫藥上可做檢驗時的組織固定劑、以及防腐劑等。而在固定劑中,最常用的是多聚甲醛。
多聚甲醛染色前固定
做實驗的過程中,因為排不上實驗儀器、希望標本能夠較長時間存放等等原因,很多實驗人員習慣性都會用4%多聚甲醛預先固定標本。也有為了滅活標本里面可能存在的微生物(細菌、病毒等),起到安全保障作用;或者是做胞內染色前的準備,進行固定細胞 。
然而,可能很多人忽視了一點,就是如果在染色之前用多聚甲醛固定標本,細胞表面有些位點在固定后構象發生改變,使得抗體無法結合產生假陰性,也可能由于固定作用,導致其它位點產生非特異性結合(假陽性)。
因此,知道哪些抗體染色前不能預固定,十分重要。貼心的技術人員幫我們做了一系列測試,下面兩張表,可以看的出來,大多數不能固定的抗體都是趨化因子受體類目的,這類抗體,大家在實驗中要注意不能先固定后染色。
—— 人源樣本——
|
實驗樣本
|
克隆號
|
標記物
|
是否適合固定
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
L263G8
|
CCR8
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
1712380
|
CCR10
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
UCHT1
|
CD3
|
Yes
|
|
裂解全血
|
OKT3
|
CD3
|
Yes
|
|
裂解全血
|
HIT3a
|
CD3
|
Yes
|
|
裂解全血
|
SK7
|
CD3
|
Yes
|
|
裂解全血
|
OKT4
|
CD4
|
Yes
|
|
裂解全血
|
RPA-T4
|
CD4
|
Yes
|
|
裂解全血
|
UCHT2
|
CD5
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
BL-CD6
|
CD6
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
CD7-6B7
|
CD7
|
Yes
|
|
裂解全血
|
RPA-T8
|
CD8
|
Yes
|
|
裂解全血
|
HIT8a
|
CD8
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
HI111
|
CD11a
|
Yes
|
|
裂解全血
|
ICRF44
|
CD11b
|
Yes
|
|
裂解全血, 單核細胞
|
3.9
|
CD11c
|
No
|
|
裂解全血
|
WM15
|
CD13
|
Yes
|
|
裂解全血, 單核細胞
|
M5E2
|
CD14
|
Yes
|
|
裂解全血
|
HCD14
|
CD14
|
Yes
|
|
裂解全血
|
W6D3
|
CD15
|
Yes
|
|
裂解全血, 粒細胞
|
HI98
|
CD15
|
Yes
|
|
裂解全血
|
3G8
|
CD16
|
Yes
|
|
裂解全血
|
TS1/18
|
CD18
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
HIB19
|
CD19
|
Yes
|
|
裂解全血
|
EBVCS-5
|
CD23
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
ML5
|
CD24
|
No
|
|
裂解全血
|
BC96
|
CD25
|
No
|
|
裂解全血
|
O323
|
CD27
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
M-T271
|
CD27
|
Yes
|
|
裂解全血
|
CD28.2
|
CD28
|
Yes
|
|
裂解全血
|
WM59
|
CD31
|
Yes
|
|
裂解全血
|
581
|
CD34
|
No
|
|
裂解全血
|
HIT2
|
CD38
|
Yes
|
|
裂解全血
|
5C3
|
CD40
|
Yes
|
|
裂解全血
|
HI30
|
CD45
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
CC2C6
|
CD47
|
Yes
|
|
裂解全血
|
CBR-IC3/1
|
CD50
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
MEM-188
|
CD56
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
HCD56
|
CD56
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
DREG-56
|
CD62L
|
Yes
|
|
裂解全血, 單核細胞
|
IT2.2
|
CD86
|
Yes
|
|
裂解全血, 粒細胞
|
S5/1
|
CD88
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
DX2
|
CD95
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
HCD99
|
CD99
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
A019D5
|
CD127 (IL-7Rα)
|
No
|
|
裂解全血
|
Ber-ACT35
|
CD134
|
No
|
|
裂解全血
|
SE5A5
|
CD172a/b
|
Yes
|
|
裂解全血
|
LSB2.20
|
CD172g
|
Yes
|
|
裂解全血, 粒細胞. 淋巴細胞
|
8F1/CXCR1
|
CD181 (CXCR1)
|
No
|
|
裂解全血, 粒細胞
|
5E8/CXCR2
|
CD182 (CXCR2)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
G025H7
|
CD183 (CXCR3)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
12G5
|
CD184 (CXCR4)
|
Yes
|
|
裂解全血, 粒細胞
|
500000000
|
CD193 (CCR3)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
L291H4
|
CD194 (CCR4)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
T21/8
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
HEK/1/85a
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
J418F1
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
G034E3
|
CD196 (CCR6)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
G043H7
|
CD197 (CCR7)
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
L053E8
|
CD199 (CCR9)
|
No
|
|
裂解全血
|
C1.7
|
CD244 (2B4)
|
Yes
|
|
裂解全血
|
11C1
|
CD268 (BAFF-R)
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
EH12.2H7
|
CD279
|
No
|
|
裂解全血
|
TL2.1
|
CD282 (TLR2)
|
Yes
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
2A9-1
|
CX3CR1
|
No
|
|
裂解全血, 淋巴細胞
|
K0124E1
|
CX3CR1
|
No
|
|
裂解全血
|
L243
|
HLA-DR
|
Yes
|
|
裂解全血
|
MHM-88
|
IgM
|
No
|
—— 小鼠樣本 ——
|
實驗樣本
|
克隆號
|
標記物
|
是否適合固定
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
1B1
|
CD1d
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
17A2
|
CD3
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
145-2C11
|
CD3
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
RM4-5
|
CD4
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
GK1.5
|
CD4
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
RM4-4
|
CD4
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
53-7.3
|
CD5
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
53-6.7
|
CD8a
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
YTS156.7.7
|
CD8b
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
53-5.8
|
CD8b.2
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠骨髓
|
M1/70
|
CD11b
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
N418
|
CD11c
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
93
|
CD16/32
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
6D5
|
CD19
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
7000000000
|
CD21/35
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
B3B4
|
CD23
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
M1/69
|
CD24
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
LG.3A10
|
CD27
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
37.51
|
CD28
|
No
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
HMβ1-1
|
CD29
|
Yes
|
|
C57BL/6 小鼠脾臟
|
MEC13.3
|
CD31
|
杭州聯科生物技術股份有限公司 商家主頁地 址: 浙江省杭州市拱墅區祥園路108號智慧信息產業園三期三號樓13層 聯系人: 電 話: 4006721600 傳 真: 4006721600 Email:network@liankebio.com 相關咨詢新品速遞 | 前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit (2019-07-15T09:52 瀏覽數:18610) 做流式有一套|你知道的Treg,答題抽獎好禮不停 (2019-03-11T09:42 瀏覽數:20278) 聯科生物喊你吃年夜飯啦! (2019-01-25T13:37 瀏覽數:21630) 在皮氏培養皿中生長的血管與人類血管非常相似 (2019-01-23T15:04 瀏覽數:20875) Human ELISA Kit 推薦:人降鈣素ELISA試劑盒 (2019-01-10T14:35 瀏覽數:20376) 聯科生物新品:妊娠研究相關試劑盒 (2019-01-09T17:05 瀏覽數:21452) 聯科生物第四季ELISA大賽——杭州站 (2019-01-04T15:33 瀏覽數:20314) 全血 Foxp3 實驗操作步驟 (2018-12-10T09:52 瀏覽數:26271) 人 Treg 試劑盒操作步驟 (2018-12-06T10:03 瀏覽數:25700) 流式胞內染色步驟 (2018-11-12T11:34 瀏覽數:23471) ADVERTISEMENT
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