【細胞介紹】
AC16是一種由成人心臟心室組織的原代細胞與經SV40轉化的尿苷營養缺陷型的人成纖維細胞(缺乏線粒體DNA)融合而來的雜交細胞系,顯示出心肌細胞的典型特征,包括轉錄因子如GATA4、MYCD、NFATc4的表達,以及收縮蛋白如α -和β -肌球蛋白重鏈。AC16細胞也表達間隙連接蛋白connexin-43和connexin-40,染料偶聯研究證實其具有功能性間隙連接,強調其在心肌細胞研究中的應用。當SV40癌基因被沉默時,AC16轉變為更分化的狀態,以BMP2的表達為標志,表明心臟分化和發育調節。
科學家們采用各種技術,包括干細胞分化、動物模型、分子分析和生物標志物發現,來推進心臟相關疾病的知識和潛在治療。有絲分裂原和衰老途徑的參與,以及胸苷激酶的誘導,進一步闡明了人類心肌細胞的復雜性及其對病理條件的反應。
AC16人心肌細胞系具有模仿成熟心肌細胞行為的能力,使其成為心臟研究的一個有價值的模型。它與原代心肌細胞的遺傳組成非常相似,允許在體外研究心臟發育、病理和組蛋白丟失的含義,然而,心肌細胞的行為和遺傳復雜性可能與原代或干細胞衍生的心肌細胞不完全匹配。在毒理學和心血管疾病研究的背景下,AC16細胞是了解心肌細胞發育、炎癥、損傷、再生和毒理學效應的重要工具。
AC16人類心肌細胞細胞系的獨特特性,包括其對發育線索的反應和模擬人類心肌細胞生理條件的能力,使其成為解開心臟病奧秘和設計新的治療干預措施的有用模型。
以下是中喬新舟拍攝的AC16細胞拍攝的在不同放大倍數下的圖片:

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細胞名稱:AC16人心肌細胞
細胞別稱:AC16;AC16 [Human hybrid cardiomyocyte]
產品貨號:ZQ0960
生長特性:貼壁
培養條件 :DMEM/F12基礎培養基(中喬新舟 貨號:ZQ-600)+10%胎牛血清 (品牌:中喬新舟 貨號:ZQ500-A)+1%P/S(品牌:中喬新舟 貨號:CSP006)
完全培養基貨號:ZM0960
【細胞傳代】
1.細胞有脫落情況時,將培養液轉移到無菌離心管中,離心(125g,3~5分鐘)1000-1200rmp收集懸浮細胞(漂浮細胞少,可能無沉淀,大部分在管壁上);輕柔去除培養基,等貼壁細胞消化收集在一起混勻接種。
2.貼壁細胞用PBS洗1~2次,每次3-5ml,添加1ml 胰酶(0.25% 含EDTA)到細胞瓶中,輕輕搖勻,使胰酶溶液鋪滿細胞表面,放入培養箱中。1-3min后取出到顯微鏡下觀察,(若細胞無變化繼續放入培養箱消化)一旦細胞變圓、輕拍瓶尾部大部分細胞開始脫落,當達到70-80%細胞漂浮脫落,立即加入5ml完全培養基(含10%FBS)中和。用移液管輕輕吹打6-8次,使細胞充分解離。
3.將細胞懸液轉移到無菌離心管中,計數,離心收集細胞。用適量完全培養基重懸細胞沉淀,使細胞密度為每毫升0.6-2X105。將細胞懸液轉至培養瓶中,靜置于培養箱中。建議T25培養瓶添加5-7ml完全培養基,以后2-3天進行換液。
【細胞凍存】
1.細胞密度80%以上,活細胞百分率達95%以上時,將細胞按照以上步驟進行消化收集細胞沉淀進行凍存。
2.細胞沉淀用適量4°C凍存液(貨號:CSP042)重懸, 建議一瓶T25細胞凍存一管(1ml/管),直接將分裝好的細胞凍存管置于-80℃超低溫冰箱中過夜,若需液氮長期保存,需先置于-80℃至少一天后方可轉至液氨罐中。
NOTE:若不是我司凍存液請按照凍存液說明書操作,若是自配凍存液需梯度降溫凍存(2-8℃,放置 40min:-20℃,放置 30min-60min,-80℃放置一天后轉移至液氮保存)或使用程序降溫盒降溫后,再轉移至液氮中保存。
【細胞復蘇】
1.液氮取出的細胞放入干冰中轉移到細胞房,提前準備好完全培養基,離心管。
2.凍管細胞在37°C水浴中迅速解凍(大約1-2分鐘)。為了減少污染的可能性,保持凍管瓶蓋在水浴液面之上。 一旦大部分內容物解凍,立即將凍管移出水浴,70%的乙醇消毒凍管外壁。
3.將內容物轉移到含3-6mL完全培養基的離心管中,輕輕混勻,離心(125 g,3~5分鐘)1000-1200rmp去除培養基, 細胞沉淀用手指彈松,添加3ml完全培養基混勻細胞并進行計數,用適量完全培養基將細胞密度調整至0.6-2.0X105,轉移至培養瓶中,于培養箱中靜置培養。建議T25培養瓶添加5-7ml完全培養基。當密度達到80%以上時傳代。
【常見問題】
1、何時須更換培養基
視細胞生長密度而定,常規細胞2-3天更換培養基。
2、何時進行傳代
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
首次傳代建議1:2傳代,就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
3、可否使用與原先不同培養基
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基,若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基,細胞大都無法立即適應,易造成細胞狀態不好,最終造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先不同血清種類
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
【發表過的文獻】
截至到2024年,引用中喬新舟該細胞發表過的文獻總數9篇,總的影響因子54.2,最高影響因子12.70,數據如下:

下面列舉了幾篇代表性的文獻,可以參考:
1.論文題目:TRIM21 promotes ubiquitination of SARS-CoV-2 nucleocapsid protein to regulate innate immunity.
期刊: JOURNAL OF MEDICAL VIROLOGY 影響因子:12.7
2.論文題目:PCSK6 attenuates cardiac dysfunction in doxorubicin-induced cardiotoxicity by regulating autophagy.
期刊: FREE RADICAL BIOLOGY AND MEDICINE 影響因子:7.4
3.論文題目:Altered Expression of Transfer-RNA-Derived Small RNAs in Human With Rheumatic Heart Disease.
期刊: Frontiers in Cardiovascular Medicine 影響因子:6.05
4.論文題目:GSK-J4, a Specific Histone Lysine Demethylase 6A Inhibitor, Ameliorates Lipotoxicity to Cardiomyocytes via Preserving H3K27 Methylation and Reducing Ferroptosis.
期刊: Frontiers in Cardiovascular Medicine 影響因子:5.846
5.論文題目:Knockdown of KLF6 ameliorates myocardial infarction by regulating autophagy via transcriptional regulation of PTTG1.
期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY 影響因子:5.0
