作為一種廣泛使用的胰島β細(xì)胞系,正以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)成為糖尿病機(jī)制研究、藥物篩選及治療開發(fā)的重要工具。今天,讓我們一起揭開MIN6細(xì)胞培養(yǎng)的神秘面紗。
一、胰島β細(xì)胞的理想替代
MIN6細(xì)胞是從轉(zhuǎn)基因小鼠胰島瘤中分離得到的一種永生化細(xì)胞系,保留了胰島β細(xì)胞的許多關(guān)鍵特性,包括:
胰島素分泌功能:MIN6細(xì)胞能夠響應(yīng)葡萄糖刺激,分泌胰島素,是研究胰島素分泌機(jī)制的理想模型。
穩(wěn)定性:作為一種永生化細(xì)胞系,MIN6細(xì)胞可以在體外長(zhǎng)期培養(yǎng),避免了原代胰島細(xì)胞壽命有限的問(wèn)題。
易操作性:MIN6細(xì)胞易于傳代和凍存,適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)和高通量篩選。
二、MIN6細(xì)胞的培養(yǎng)
培養(yǎng)基:DMEM (中喬新舟 貨號(hào):ZQ-100)+10%FBS(中喬新舟 貨號(hào):ZQ0500)+1%P/S(中喬新舟 貨號(hào):CSP006)。
細(xì)胞特性:MIN-6細(xì)胞不規(guī)則、無(wú)細(xì)胞形態(tài),貼壁性差,細(xì)胞成片狀形成小島嶼,密度高后島嶼連接形成大片,該細(xì)胞匯合度達(dá)不到100%密度。
傳代頻率: T25瓶80%匯合度,1:2傳代需要3-5天再次進(jìn)行傳代。
換液頻率:2-3次/周(T25瓶7ml完全培養(yǎng)基)。
(中喬新舟MIN-6細(xì)胞培養(yǎng)圖 10X)
三、Min6培養(yǎng)注意的細(xì)節(jié):
培養(yǎng):細(xì)胞貼壁性不好,培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)有漂浮的圓形細(xì)胞,屬于正常現(xiàn)象。
傳代:在消化過(guò)程中,當(dāng)細(xì)胞成片脫落后,建議再室溫延長(zhǎng)消化2min,讓團(tuán)塊分散開一些。
運(yùn)輸: 由于MIN-6細(xì)胞形態(tài)無(wú)規(guī)則性,貼壁性差,發(fā)貨T25瓶到貨后會(huì)出現(xiàn)一些不可控因素,可能會(huì)脫落,皺縮漂浮,如下到貨細(xì)胞狀態(tài),應(yīng)該怎么處理呢?下面由小編給大家匯總一下吧。
(我司客戶到貨T25復(fù)蘇瓶MIN-6細(xì)胞圖)
到貨T25細(xì)胞處理步驟:
1. 到貨發(fā)現(xiàn)有任何異常現(xiàn)象,污染、漏液、細(xì)胞漂浮等,請(qǐng)拍10X、 20X 各 2-3 張照片,并當(dāng)天聯(lián)系我司銷售人員/區(qū)域代理或者我司技術(shù)人員。
2. 用 75%酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,滿瓶培養(yǎng)基狀態(tài)置于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)2~4h 后進(jìn)行操作。
3. 2-4小時(shí)后觀察貼壁情況,若部分漂浮,需收集懸液,1200rpm/5min(約 250g 離心力)離心,收集漂浮細(xì)胞。
4. 瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞消化步驟:
培養(yǎng)基去除干凈,用PBS輕輕洗滌細(xì)胞。(T25瓶3-5ML)
加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37℃消化3-5分鐘。手掌心拍打瓶尾部,顯微鏡下觀察,細(xì)胞消化成流沙狀成單個(gè)細(xì)胞脫落。
加入3-5ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細(xì)胞至單細(xì)胞懸液,合并懸浮細(xì)胞。
按1:2的比例將細(xì)胞接種至新的培養(yǎng)瓶中。
5. 消化1:2傳代后第二天細(xì)胞狀態(tài)圖:
(MIN-6細(xì)胞1:2傳第二天,圖片由中喬客戶提供)
6. 培養(yǎng)3天后細(xì)胞狀態(tài)圖,此時(shí)可再次進(jìn)行傳代分瓶。
(中喬新舟客戶提供,手機(jī)拍攝)
7.若培養(yǎng)過(guò)程中或?qū)嶒?yàn)鋪板漂浮細(xì)胞多,可用多聚賴氨酸處理細(xì)胞培養(yǎng)瓶或孔板,讓細(xì)胞貼壁更牢固。
四、選擇MIN6細(xì)胞,開啟糖尿病研究的新篇章!
如果您在培養(yǎng)MIN6細(xì)胞方面有任何問(wèn)題,歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們!我們將為您提供專業(yè)的技術(shù)支持和優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),助您在糖尿病研究的道路上走得更遠(yuǎn)!
MIN-6胰島β細(xì)胞的理想替代!
作者:上海中喬新舟生物科技有限公司 2025-03-10T00:00 (訪問(wèn)量:37486)
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