ELISA(酶聯免疫吸附劑測定)是一種快速、靈敏、準確可靠的一種定量分析方法,樣本的處理對于ELISA實驗的成功有著舉足輕重的作用。 利用ELISA進行檢測的樣本類型包括常見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到
ELISA實驗的結果。下面就不常見ELISA痰液樣本處理方法的整理,希望對您有所幫助。
1)選擇痰液中較為粘稠部分稱重, 加兩倍于痰量的 0.1% DTT(二硫蘇糖醇)。DTT 的主要作用是溶解粘液,用吸管反復吹打,漩渦器振蕩 15s,37 度恒溫水浴振蕩 5 分鐘;
2)加入兩倍于痰量的 PBS 緩沖液繼續振蕩 15-20 分鐘,150 目的金屬絲網過濾,1500 rpm 離心 10 分鐘吸取上清液檢測。
處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程,由于蛋白容易變性,降解,故該過程應盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要,尤其注意不要反復凍融,樣本處理之后可分裝密封保存,4 度保存應小于 1 周,-20 度不應超過 1 個月,-80 度不應超過 2 個月。在標本使用前應緩慢均衡至室溫,不應加熱使之融解。樣本的處理是實驗成功的第一步, 以上就是關于 Elisa 特殊樣本處理方法的簡述,供研究者參考。
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