
神經(jīng)干細(xì)胞群內(nèi)的微脈管系統(tǒng)促進其自我更新并調(diào)節(jié)譜系發(fā)展。前期研究表明內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的可溶性因子是神經(jīng)祖細(xì)胞(NPC)命運和增殖的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者;但內(nèi)皮細(xì)胞對局部血流動力敏感,且這個重要生理過程的作用還沒有確定。倫斯勒理工學(xué)院生物技術(shù)和多學(xué)科研究中心的Deanna Thompson博士團隊評估了成體小鼠神經(jīng)祖細(xì)胞對從靜態(tài)或動態(tài)(流動)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)中分離出來的可溶性因子的反應(yīng)。在動態(tài)條件下產(chǎn)生的內(nèi)皮因子明顯增加神經(jīng)元分化,而靜態(tài)條件下釋放的因子刺激少突膠質(zhì)細(xì)胞分化。流動條件增加內(nèi)皮細(xì)胞神經(jīng)性因子和硫酸肝素粘多糖的釋放,其可以增加它們的生物活性,可能是增強神經(jīng)元分化的基礎(chǔ)。此外,內(nèi)皮因子,特別是靜態(tài)條件下的內(nèi)皮因子,促進貼壁生長。同時,他們的數(shù)據(jù)表明血流量可能影響增殖、貼壁和成體神經(jīng)祖細(xì)胞神經(jīng)元-神經(jīng)膠質(zhì)命運的選擇,啟示減少血流量的疾病和老化形成。
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內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)中不同的細(xì)胞因子表達分析(D:動態(tài);S:靜態(tài))


主要實驗方法:
1. 內(nèi)皮細(xì)胞染色和成像(鬼筆環(huán)肽、Hoechst 33342)
2. Caspase比色測定(caspase colorimetric assay kit)
3. 神經(jīng)祖細(xì)胞分離和培養(yǎng)(N2 supplement、N21 supplement、FGF2、EGF)
4. 細(xì)胞因子水平分析(ELISA/Luminex)
