COVID-19藥物
自2019年12月份報(bào)道的第一例新冠肺炎患者到如今新冠病毒的全球大流行，科學(xué)家們不斷地對病毒及其致病機(jī)理進(jìn)行深入研究，包括各類型的預(yù)防性新冠疫苗和治療性藥物的開發(fā)。目前，高效的抗COVID-19藥物的開發(fā)是研究的重點(diǎn)之一, 最著名的 COVID-19 潛在候選藥物是洛匹那韋/利托那韋、利巴韋林、 氯喹、瑞德西韋和法匹拉韋。在候選藥物中，瑞德西韋已于 2020 年獲得美國和日本 FDA 批準(zhǔn)用于治療 COVID-19，但其治療效果仍存在爭議。
2021年12月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院蔣建東、彭小忠，河南師范大學(xué)常俊標(biāo)及武漢大學(xué)程真順共同通訊在Signal Transduction and Targeted Therapy（IF=18.187）期刊發(fā)表研究論文。該研究發(fā)現(xiàn)口服FNC可使藥物以活性形式在胸腺內(nèi)大量富集，有效抑制SARS-CoV-2體內(nèi)復(fù)制，保護(hù)胸腺免疫功能，快速治愈COVID-19患者。
{核苷類似物
2'-deoxy-2'-β-fluoro-4'-azidocytidine，稱為 azvudine（阿茲夫定）或 FNC，是一種前藥，可在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為 FNC 三磷酸并抑制病毒RdRp。對病毒具有廣譜活性，包括 HCV 和 EV71，目前是中國抗艾滋病的在研藥物。Azvudine (FNC) 是一種核苷類似物，可抑制 HIV-1 RNA 依賴性 RNA 聚合酶 (RdRp)。}
Experiment實(shí)驗(yàn)部分
在實(shí)驗(yàn)支撐方面，文中從體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，恒河猴體內(nèi)實(shí)驗(yàn)以及COVID-19患者臨床試驗(yàn)三個(gè)方面證實(shí)了FNC的抗病毒效果。
在體外細(xì)胞層面上驗(yàn)證了CL-236（FNC單磷酸化類似物）的抗冠狀病毒作用后，隨即作者利用恒河猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，用 FNC（0.07 mg/kg，每天一次，口服）治療感染了SARS-CoV-2的恒河猴，結(jié)果表明治療后的恒河猴中病毒載量明顯下降。
01
組織水平上，作者對肺組織進(jìn)行切片與免疫熒光染色，利用奧地利TissurGnostic公司的TissueFAXS掃描系統(tǒng)進(jìn)行成像，很明顯的觀察到在經(jīng)過FNC治療后的肺組織中病毒S-蛋白和N-蛋白的表達(dá)顯著下降。
Fig.1 肺組織免疫熒光圖像
02
多項(xiàng)證據(jù)表面FNC在胸腺發(fā)揮重要角色，為了進(jìn)一步驗(yàn)證FNC在胸腺中的抗病毒作用，作者同樣對胸腺組織進(jìn)行多重免疫染色，利用TissueFAXS掃描系統(tǒng)進(jìn)行成像，并使用TissueQuest定量分析系統(tǒng)對相關(guān)表達(dá)蛋白進(jìn)行精準(zhǔn)定量，展示獨(dú)特的組織流式散點(diǎn)圖，結(jié)果表面口服FNC能夠明顯下調(diào)胸腺中病毒S蛋白的表達(dá)。
Fig.2 胸腺多重免疫熒光圖像及組織流式結(jié)果
03
與此同時(shí)，作者對胸腺組織細(xì)胞進(jìn)行了TUNEL染色，使用TissueQuest定量分析系統(tǒng)定量治療組與非治療組中的胸腺凋亡細(xì)胞的相對比例和絕對數(shù)量，發(fā)現(xiàn)未治療組中的凋亡細(xì)胞比例和數(shù)量顯著高于治療組。
Fig.3 胸腺凋亡細(xì)胞的相對比例和絕對數(shù)量
04
結(jié)合單細(xì)胞測序發(fā)現(xiàn)FNC治療后的免疫群體發(fā)生明顯改變，為了驗(yàn)證這一結(jié)論，作者再次采用多重免疫熒光染色，對主要的免疫細(xì)胞進(jìn)行染色觀察，TissueQuest定量分析結(jié)果表明FNC處理組(兩組n = 4)的猴子胸腺CD3+、CD20+、CD3+/CD4+和CD3+/ CD8+的百分率和絕對數(shù)量均明顯增加。
Fig.4 多重免疫熒光胸腺樣本及免疫細(xì)胞表達(dá)
最后，研究者們進(jìn)行了 FNC 的一項(xiàng)隨機(jī)、單臂臨床試驗(yàn)（n =
31）。結(jié)果表明，口服 FNC治愈了所有 COVID-19 患者。FNC可能是通過其集中在胸腺的抗 SARS-CoV-2 活性，以及增強(qiáng)免疫力來治愈COVID-19。本文認(rèn)為 FNC 是一種針對 SARS-CoV-2 的高效藥物，而胸腺是抗 COVID-19 免疫的關(guān)鍵器官，FNC 的發(fā)現(xiàn)對于應(yīng)對當(dāng)前的 COVID-19 和未來的冠狀病毒流行非常重要。我們可以看到，作者多次使用免疫熒光對相關(guān)關(guān)鍵證據(jù)進(jìn)行原為驗(yàn)證，再次體現(xiàn)了原位數(shù)據(jù)的可靠性。