在慢性疼痛機制研究與神經藥物測試中，背根神經節（DRG）如同揭開神經奧秘的 “鑰匙”。精準的 DRG 原位注射和神經節取材技術，是科研人員探索神經信號傳導的核心技能。今天為大家拆解這套高難度實驗操作，附詳細步驟與避坑指南，建議收藏！
1. 麻醉與固定
2. 定位與暴露
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沿著背部正中線切開皮膚，接著分離肌肉。
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仔細咬除目標節段（像 L4、L5）的椎板，使硬脊膜以及下方呈晶瑩珠狀的 DRG 暴露出來。
3. 鏡下精準注射
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在體視顯微鏡下開展操作，用精細鑷子輕輕提起或者穩定 DRG 周圍的組織。
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選用微量注射器或者胰島素針。
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讓針尖小心刺入 DRG 包膜，緩慢且穩定地注入預定體積的溶液（一般為 nL-μL 級）。
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要避免過度牽拉、刺穿神經根以及注射速度過快，以防造成組織損傷或者溶液外溢。
4. 縫合與恢復
仔細縫合肌肉層和皮膚，為動物做好保暖措施助其復蘇，同時密切監測動物狀況。
（切除椎板時需注意勿損傷脊髓以及神經束）
從暴露到保存的黃金流程
1. 麻醉與固定
2. 充分暴露椎管
3. 精細分離與摘取
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在顯微鏡下，使用精細鑷子和剪刀：
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輕柔地分離 DRG 周圍的硬膜、脂肪以及結締組織。
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清晰辨別與 DRG 相連的背根（感覺根，向脊髓延伸）和脊神經（向外周延伸）。
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在靠近 DRG 本體的位置切斷背根和脊神經。
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用鑷子輕輕夾住神經殘端或者 DRG 包膜（避免擠壓胞體），將完整的 DRG 取出。
4. 即刻處理
取材之后，立即根據實驗目的進行處理。例如，若用于 RNA / 蛋白研究，可將其速凍于液氮中；若用于形態學研究，可將其固定于多聚甲醛（PFA）中。
以下附上大小鼠神經節取材圖片以及體視鏡下神經節大體圖片
如圖中所示，能明顯觀察到神經束上有一處膨大組織（神經節）
?? 避坑指南：資深科研人員的血淚經驗
1. 注射失敗補救方法
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針頭堵塞：將針退回 5nL，然后再推進，利用壓力沖開堵塞物。 -
位置偏移：注射器接熒光染料（如 Fast Blue），在紫外燈下確認染料分布情況。
2. 保障取材完整性
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在 DRG 下方墊上濕潤的濾紙片，防止發生粘連。 -
遇到粘連性結締組織時，滴加膠原酶 IV（1mg/ml），孵育 2 分鐘后再進行分離。
3. 提高術后生存率
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在椎板缺損的位置覆蓋可吸收明膠海綿。 -
術后連續 3 天皮下注射美洛昔康（5mg/kg）和恩諾沙星（10mg/kg）。
本文整理自實驗手冊，實操需嚴格遵循動物倫理規范及實驗室安全準則。
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作者 | 袁洪森
排版 | 翁小云
統籌制作 | 深圳靈賦拓普生物科技有限公司
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