組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TG2)是一種在癌細(xì)胞中過(guò)表達(dá)的酶，能促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移和對(duì)化療耐藥性。是轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶家族中最常見(jiàn)及研究最多的成員。其在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及其與卵巢癌侵襲、轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性。但其在癌癥和宿主機(jī)體所產(chǎn)生的不同效應(yīng)背后的機(jī)制，目前研究人員并不清楚。
美國(guó)西北大學(xué)Feinberg醫(yī)學(xué)院的研究人員在Journal
for ImmunoTherapy of Cancer（IF=13.8）期刊上發(fā)表文章通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)了宿主組織內(nèi)轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶（TG2）的缺失通過(guò)改變卵巢癌中STAT1/STAT3的磷酸化，增強(qiáng)抗腫瘤T細(xì)胞免疫。TG2或許在調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能上起著非常重要的作用。
文中通過(guò)使用 TG2-/- 同系卵巢癌小鼠模型，評(píng)估了宿主組織中TG2缺乏對(duì)抗腫瘤免疫和腫瘤進(jìn)展的影響。結(jié)果觀察到宿主TG2缺失抑制了腫瘤生長(zhǎng)和腹水積聚，并增強(qiáng)了CD8+ T細(xì)胞的細(xì)胞毒性功能，導(dǎo)致CD8+ T細(xì)胞浸潤(rùn)增加，腹腔液中髓細(xì)胞數(shù)量減少。從機(jī)制上講，缺乏 TG2 會(huì)增強(qiáng)促進(jìn) T 細(xì)胞活化的信號(hào)，增加細(xì)胞因子誘導(dǎo)的 STAT1 ，導(dǎo)致CD8+和CD4+ T細(xì)胞中局部細(xì)胞因子對(duì)STAT3信號(hào)的抑制。為了應(yīng)對(duì)由TG2缺失引起的更強(qiáng)的免疫反應(yīng)，腹腔內(nèi)生長(zhǎng)的癌細(xì)胞表現(xiàn)出干擾素-γ (IFN-γ)響應(yīng)基因特征，并開(kāi)始凋亡。這些數(shù)據(jù)表明 TG2 作為抗腫瘤 T 細(xì)胞免疫的衰減劑，是一種新的免疫調(diào)節(jié)靶標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)部分
文中首先采用多色流式細(xì)胞術(shù)對(duì)腹膜環(huán)境中的免疫細(xì)胞進(jìn)行表型分析，通過(guò)RNA測(cè)序、增殖和凋亡分析來(lái)表征從惡性腹水中獲得的癌細(xì)胞。
隨后通過(guò)免疫組化分析了人卵巢癌TMA芯點(diǎn)，評(píng)估了腫瘤間質(zhì)中TG2的表達(dá)是否影響了腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞的浸潤(rùn)，與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了互相印證。
文中從102個(gè)點(diǎn)的TMA樣本中，剔除了18個(gè)點(diǎn)，剩余84個(gè)點(diǎn)的人卵巢癌樣本納入分析。對(duì)TG2和CD8進(jìn)行染色，使用TissueFAXS i Plus成像系統(tǒng)自動(dòng)掃描TMA，并對(duì)圖像進(jìn)行定量分析。有代表性的成對(duì)標(biāo)本顯示了間質(zhì)TG2低表達(dá)(左)和高表達(dá)(右)的腫瘤中TG2和CD8的表達(dá)。根據(jù)檢測(cè)到的CD8+ T細(xì)胞數(shù)量，將腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞浸潤(rùn)分為0、1、2級(jí)。結(jié)果表明人卵巢癌標(biāo)本間質(zhì)TG2表達(dá)與腫瘤內(nèi)CD8+ T細(xì)胞浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)。
為了量化分析，將掃描后的TMA導(dǎo)入StrataQuest 圖像分析軟件，通過(guò)定制的APP分析從間質(zhì)組織區(qū)域中區(qū)分上皮細(xì)胞，并通過(guò)單細(xì)胞識(shí)別和圖像散點(diǎn)圖設(shè)cut-off線量化DAB(CD8和TG2)信號(hào)(強(qiáng)度和豐度)。
數(shù)據(jù)結(jié)果表明，在卵巢癌腫瘤微環(huán)境中，TG2在宿主體內(nèi)的缺失能促進(jìn)抗腫瘤毒性T細(xì)胞反應(yīng)，導(dǎo)致免疫抑制信號(hào)丟失，限制了疾病發(fā)展。文中提出TG2作為抗腫瘤T細(xì)胞免疫的衰減劑，是一個(gè)新的免疫調(diào)節(jié)靶標(biāo)。