聯科生物推出一波分子新品，電泳是分子最基礎的實驗，今天小科先和大家聊聊如何得到一張漂亮的電泳圖。
一、做一塊優(yōu)質的瓊脂糖凝膠
“工欲善其事，必先利其器”，能否做一塊好的瓊脂糖凝膠，直接影響到后面電泳和結果的分析。制膠前，小科給大家的建議：
1. 在制膠時必須將制膠模具、梳子以及燒杯等物品洗凈，以免干膠及其他雜質帶入；
2. 在溶膠時應觀察溶液中是否有未溶解的瓊脂糖顆粒，確保溶膠完全；
3. 在溶液倒入制膠模具前必須充分混勻，以免制出來的膠出現不均勻的現象。
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| 圖一：制膠時帶入了其它雜質，形成了障礙物，使得DNA條帶電泳時受到阻礙無法繼續(xù)電泳，從而形成扭曲帶 |
圖二：制膠時溶膠不完全以致瓊脂糖顆粒殘留，形成一些濃度較高的凝膠區(qū)域，在DNA電泳經過這些區(qū)域時，部分DNA被阻礙在這里而形成不規(guī)則亮帶。 |
二、選擇合適濃度的瓊脂糖凝膠
凝膠的濃度是常被忽略問題。小科建議：長片段的DNA選用低濃度的凝膠電泳，短片段的DNA則選用高濃度的凝膠電泳。
表一：分離不同大小的DN**段所用的最適凝膠濃度
| 凝膠濃度 | 0.5% | 0.7% | 1% | 1.2% | 1.5% | 2% |
| DNA長度 | 1kb-30kb | 800bp-12kb | 500bp-10kb | 400bp-7kb | 200bp-3kb | 50bp-2kb |
三、選擇合適的核酸上樣量電泳
要想電泳跑出可見條帶的話，至少需要上樣50 ng，但是0.5 cm寬的梳子最好不超過0.5μg的DNA量，因為上樣量過多會造成加樣孔超載，從而導致拖尾或彌散，對于較長的DNA此現象更為明顯。另外，加樣量的多少還應依據加樣孔的大小及DN**段的長度而定，當加樣孔大時，樣品上樣量應相應加大。
四、選擇合適的電壓電泳
通常情況下電壓越低，走出的電泳條帶越平整。低電壓電泳時，電泳緩沖液也不容易發(fā)燙，也能確保在電泳的過程中凝膠不會變形。當然電壓太低，等待電泳結果的時間就會延長，綜合考慮，一般控制電泳電壓≤5V/cm，即可保證電泳條帶的清晰度。
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| 圖三和圖四同一樣本跑出的圖，但是出來的效果差別非常大，主要是因為電泳時的電壓不同 圖三由于電泳的電壓過大，導致電泳條帶都扭曲變形了。 |
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五、選擇合適的電泳距離（控制電泳時間）
一些片段的DNA，電泳20-30min家常便飯，有的甚至需要更長的時間，如果想稍微快一點，可以選用濃度比較稀的凝膠或稍微調高一點電壓進行電泳。
希望以上信息對大家有幫助。以上文章轉載于丁香園核酸技術論壇。