血管鈣化指血管壁沉積羥基磷灰石等鈣鹽，導致血管變硬、彈性喪失。在慢性腎?。?/span>CKD）患者中，該現象普遍存在，可顯著增加心梗、腦卒中風險 —— 鈣化斑塊破裂是心腦血管事件的主要誘因。目前，臨床尚無有效阻止或逆轉血管鈣化的藥物。
近期，中山大學、南方醫科大學研究團隊在醫學國際期刊《Circulation Research》上發表重要成果Lan Z,et al.E3 Ubiquitin Ligase TRIM16-Mediated K63-linked Ubiquitination of DAB2 Enhances Integrin β1 Endocytosis to Facilitate Vascular Calcification. 通過轉錄組測序、動物模型及人體組織分析，他們發現 E3 泛素連接酶家族成員 TRIM16，在鈣化血管組織中含量顯著升高（如圖 1 所示）。
功能驗證過表達實驗：在血管平滑肌細胞（VSMCs）及慢性腎病大鼠中人為增加 TRIM16 含量，血管鈣化顯著加重，細胞呈現更多 “成骨樣” 變化 —— 骨形成標志物 Runx2、BMP2 表達增加，血管收縮標志物 α-SMA、SM22α 減少（如圖 2 所示）。
敲低 / 敲除實驗：利用 siRNA、腺相關病毒 shRNA 及血管平滑肌細胞特異性基因敲除技術降低或消除 TRIM16 后，在 VSMCs 及高磷誘導、維生素 D3 過載、慢性腎病三種動物模型中，血管鈣化均顯著抑制，鈣鹽沉積減少，VSMCs 更多保持正常特性（如圖 3、圖 4 所示）。
研究團隊通過免疫沉淀 - 質譜分析等技術，揭示其作用路徑：
TRIM16 通過其 SPRY 結構域，與 DAB2 的富含脯氨酸結構域（PRD）結合，對 DAB2 的 K656 位點進行 K63 連接型泛素化修飾。該修飾不降解 DAB2，而是激活其功能（如圖 5 所示）。
激活的 DAB2 顯著增強細胞膜上整合素 β1（Integrinβ1）的內吞作用，導致細胞表面 Integrinβ1 減少、胞內增多。此過程激活 FAK-STAT3 信號通路 ——STAT3 進入細胞核，促進成骨基因表達，最終導致 VSMCs 向骨樣細胞轉化并分泌鈣鹽，引發鈣化。
敲低 DAB2 可阻斷 TRIM16 過表達對 Integrinβ1 內吞及 FAK-STAT3 信號的激活作用；使用 STAT3 抑制劑 Stattic，同樣可阻斷 TRIM16 的促鈣化作用（如圖 6 所示）。
綜上，TRIM16 通過 “TRIM16→DAB2 K656 K63 泛素化→Integrinβ1 內吞→FAK-STAT3 激活→成骨分化 / 鈣化” 信號軸驅動血管鈣化。
01 理論突破
首次明確 TRIM16 為 CKD 背景下血管鈣化的關鍵驅動因子；首次闡明非降解性 K63 泛素化修飾（TRIM16 催化 DAB2 K656 位點）在血管鈣化中的核心調控作用；完整揭示 TRIM16-DAB2 - 整合素 β1-FAK-STAT3 全新信號軸。
02 潛在靶點
TRIM16、DAB2（尤其是 K656 位點）、SPRY-PRD 相互作用結構域、Integrinβ1 內吞過程、FAK-STAT3 信號通路，均為抗血管鈣化藥物開發的潛在靶點。針對 TRIM16-DAB2 軸的抑制劑，或成為 CKD 血管鈣化治療新策略。
在慢性腎病血管鈣化的研究中，可靠的動物模型是探索機制、驗證靶點的重要基礎。深圳靈賦拓普生物在該模型構建方面擁有成熟經驗，可為相關研究提供穩定支持。
a. 6-8 周齡雄性 C57 小鼠適應性飼養 7 天。
b. 隨機分組后，每日灌胃 200μl 腺嘌呤 - 酪蛋白混合溶液（含 100 mg/kg 腺嘌呤和 20% 酪蛋白），持續 3 周。
c. 眼眶采血檢測肌酐、尿素氮等腎功能指標。
d. 隨后每日皮下注射 5×10^5IU/kg 維生素 D3，連續 3 天，給予普通飼料飼養 3 天后取樣檢測（流程圖如圖 7 所示）。
與對照組相比，模型組腎功能指標肌酐（CREA）、尿素氮（UREA）顯著升高（P＜0.05），腎組織病變明顯，主動脈鈣化嚴重（如圖 8 所示），充分證明模型構建的有效性。
深圳靈賦拓普生物憑借專業的技術團隊和標準化的實驗流程，可根據研究需求提供定制化的模型構建服務，助力科研人員在慢性腎病血管鈣化的機制研究、藥物篩選等領域高效推進項目進展。
（注：文中機制研究相關圖示及數據均來自 Lan Z, et al. 在《Circulation Research》發表的研究成果）
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近期，中山大學、南方醫科大學研究團隊在醫學鈣化血管組織中含量顯著升高（如圖 1 所示）。