新一代單細胞技術GEM-X技術簡介
Chromium單細胞利用微流體“雙十字”交叉系統,將含barcode的凝膠珠(GelBeads)、細胞和酶的混合物、油二者混合,形成GEMs(油包水的微體系)。GEMs形成后,細胞裂解,凝膠珠自動溶解釋放大量barcode 序列,隨后mRNA逆轉錄產生帶有10x barcode和UMI信息的cDNA,構建標準測序文庫,其中10x barcode用于區分細胞,UMI用于mRNA的定量。


新一代單細胞技術Chromium GEM-X與Chromium X/iX儀器無縫整合。與之前的3’v3.1版本相比,這項技術的特點包括:
所有這些優勢集中在一起,可以獲得更高質量的單細胞RNA測序數據。實測細胞數的增加和檢測到的基因數的提升,不僅能夠檢測出更加豐富的細胞類群,而且在數據分析過程中,也能夠改善單細胞數據聚類分群的結果,能夠大大提高細胞聚類分群的分辨率。此外,對于5’免疫分析試劑盒,GEM-X的優勢在于能夠獲得更多V(D)J信息,包括利用豐富的V(D)J轉錄本揭示更多的獨特克隆型。

新一代Chromium GEM-X示例數據展示
目前伯豪生物已經基于高通量單細胞RNA文庫制備試劑盒GEM-X開展了正式的項目實驗。下面具體展示人的PBMC樣本和腫瘤組織樣本基于GEM-X進行單細胞3’RNA測序的數據。數據結果顯示,PBMC樣本實測細胞數達到1萬以上,PBMC樣本的中位基因數達到3000左右。腫瘤組織的實測細胞數也在1萬左右,中位基因數高達5600多。
1.人PBMC樣本數據展示

2.人腫瘤組織樣本數據展示

3.不同版本Chromium單細胞RNA測序數據比較
選取相同的組織類型使用不同版本Chromium試劑盒(3’v3.1vsGEM-X)進行單細胞3’RNA測序數據比較。數據比較顯示,與3’v3.1版本試劑相比,GEM-X實測到的細胞數及中位基因數都有著明顯的提升。

