前面文章我們針對常見樣本整理了收集、保存方法，具體請查閱： http://www.liankebio.com/article-information_Tech-319.html 細胞、組織樣本怎么做才能繼續處理后面的多因子檢測呢？ 小科帶領大家來針對細胞、組織裂解液如何處理進行專題介紹。

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細胞樣本裂解方案：
? 貼壁細胞裂解方法

1.??? 培養1×10⁶-1×10⁷個細胞；

2.?? 使用胰酶消化收集細胞；

3.?? 將收集好的細胞轉移至15ml圓形離心管，4^oC, 500g離心5min；

4.?? 小心去除上清，加入5ml預冷PBS重懸細胞，4^oC, 500g離心5min；重復步驟4；

5.?? 盡可能多的去除上清，小心不要碰到細胞沉淀。

6.?? 在上步驟獲取的細胞中，加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer（EPX-99999-000）。

7.?? 吹吸混勻8-10次，冰上孵育5min；

8.?? 將所有細胞轉移到1.5ml離心管；

9.?? 4^oC, 14000g（離心機最大轉速）離心10min；

10. 將上清轉移到新管中。該上清可立即用于檢測或者保存在-80^oC;

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11.? 按照多因子檢測試劑盒操作方法檢測。25ul細胞裂解液樣本加入25ul Universal Assay Buffer（EPX-11111-000），作為一個樣本加入到樣本孔中。

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? 懸浮細胞裂解方法

1.??? 培養1×106-1×107個細胞；

2.?? 將細胞轉移到15ml圓形離心管，4^oC, 500g離心5min；

3.?? 小心去除上清，加入5ml預冷PBS重懸細胞，4^oC, 500g離心5min；

4.?? 盡可能多的去除上清，小心不要碰到細胞沉淀。

5.?? 在上步驟獲取的細胞中，加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer（EPX-99999-000）。

6.?? 吹吸混勻8-10次，冰上孵育5min；

7.?? 將所有細胞轉移到1.5ml離心管；

8.?? 4^oC, 14000g（離心機最大轉速）離心10min；

9.?? 將上清轉移到新管中。該上清可立即用于檢測或者保存在-80^oC。

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10. 按照多因子檢測試劑盒操作方法檢測。樣本孔加入25ul細胞裂解液和25ul Universal Assay Buffer（EPX-11111-000）。

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可選步驟：

建議細胞裂解后上清進行蛋白定量檢測。我們推薦使用Lowry法蛋白定量檢測。建議將所有樣本使用預冷的ProcartaPlex Cell Lysis Buffer調整樣本蛋白濃度方為4-8 mg/ml。

組織樣本裂解方案：

1． 收集組織樣本-脾臟、肺、腦、腎臟、肝臟和心臟組織，稱重。

2． 按照每100mg組織加入500ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer （EPX-99999-000）。

3． 使用研磨、機械勻漿器、磁珠裂解等方法將組織進行裂解勻漿；

4． 4^oC，16000g 離心10min；

5． 將上清轉移到新離心EP管中。

6． 使用蛋白定量試劑盒對上清進行蛋白定量。

7．使用1×PBS把樣本進行稀釋到10mg/ml；

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8． 按照多因子檢測試劑盒Protocol進行檢測。樣本孔加入25ul Universal Assay Buffer（EPX-11111-000）和25ul 稀釋后的組織上清液。

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當然，如您愿意，可以將您的樣本直接寄送給我們，我們幫您做樣本處理和多因子檢測。

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以上信息來源：

1． 細胞裂解方法：點我查看相關PDF

2． 組織裂解方法：點我查看相關PDF