人體腎臟慢性移植功能性障礙中具有平滑肌樣細胞特征的CD16 +的減少-技術前沿-資訊-生物在線

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人體腎臟慢性移植功能性障礙中具有平滑肌樣細胞特征的CD16 +的減少

作者:TG亞太公司 2022-11-01T11:02 (訪問量:11964)

目前世界有著諸多關于腎臟慢性移功能障礙(CTD)與持續性的免疫炎癥最終導致組織重塑包括肝內動脈新內膜形成。研究表明,受體來源的α-SMA +平滑肌細胞存在于異源移植腎臟CTD。含有骨髓細胞PBMC外周血單個核細胞)在體外α-SMA +具有分化能力,但是原始細胞的表型是未知的。

本研究旨在發現包含細胞與平滑肌樣細胞單細胞亞群分化能力,是腎移植受體CTD單核細胞亞群會發生變化。實驗中,CD14、CD16的表達為基礎分選健康對照組單核細胞亞群,研究骨髓間質標記α-SMA和SM22α基因表達水平。

CD14+/CD16++顯示對比增加α-SMA和SM22αmRNA表達水平與CD14++/ CD16-得到增加的分化潛能接近于平滑肌細胞。流式細胞儀結果顯示非CTD移植患者CD14+ /CD16 ++比例減少,而且CTD患者的減少比例更高為了確定CD14+/CD16 ++單核細胞和體外α-SMA +細胞生長潛力之間的關聯,健康對照組CTD移植受體,非CTD移植受體的PBMC在指定條件下培養,最終定其顯著相關性(P = 0.0002,r= 0.62)。雙染色α-SMA和CD16顯示CTD患者腎臟移植中α-SMA + CD16 +細胞的存在,即使數量很低。

數據結果表明,相比于CD14++CD16?,平滑肌細胞相關基因CD14+CD16++表達增加。CTD腎移植患者單核細胞亞群減少,可能是由于移植中的選擇性遷移的結果

在對細胞的定量分析與α-SMA的表達表現測定時,利用奧地利TissueGnostics公司Tissue FAXS顯微鏡成像系統,TissueQuest軟件分析系統。


圖像獲取部分:

Fig.5,腎臟移植中熒光染色的CD16與α-SMA的聯合表達。(A)人體脾臟中CD16/CD68, CD68/α-SMACD16/α-SMA的雙重熒光標記。其中(B) CD16/CD68, (C) CD16/CD68 , (D) CD16/α-SMA。每項中上行non-Tx代表非移植人類腎臟,下行IF/TA代表腎臟移植。(D)中箭頭指向圈出區域CD16+α-SMA+雙陽性細胞。


Fig 3 腎臟移植受體和健康對照組中單細胞亞群特征。(A)散點圖中對細胞進行正向回溯。得到細胞亞群的數量(1)總活細胞數量(2)單細胞數(3)淋巴細胞(B)健康對照組,CTD腎臟移植受體和非CTD腎臟移植受體中活細胞CD14+頻率。(C)PBMC中CD14和CD16表達類型。區域2中的數據。(D)健康對照組與腎臟移植受體的單細胞亞群的頻率。


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