機體多種細胞均可分泌非活性狀態的TGF-beta。在體外,非活性狀態的TGF-beta又稱為latency associated peptide (LAP),通過酸處理可被活化。聯科生物TGF-beta ELISA試劑盒,樣本如何活化呢,以下步驟供參考(標準品已經是活化好的,無需活化):

如 Human TGF-beta1 血清、血漿樣本活化步驟:
1、加樣:渦旋振蕩混勻樣本,血清、血漿取40uL樣本加入1.5Ml EP 管中。細胞上清樣本/尿液樣本 所需樣本體積,請看說明書。
2、加酸活化:加20Ul 1N Hcl 混合均勻,室溫孵育酸化10分鐘。
3、加堿中和:加20Ul 1N NaOH 終止酸化。
樣本活化結束。
由于血清中TGF-beta1含量較高,活化后血清樣本需經20倍預稀釋。細胞培養上清/尿液必須在活化后立即檢測分析。
另請注意:細胞培養基中的動物血清可能含有高濃度的潛隱 TGF-β1。為了獲得最好的實驗結果,在 TGF-β1 測定試驗中使用不含動物血清的細胞培養基。如果使用了含有動物血清的細胞培養基,應該設立適當的對照,確定 TGF-β1 的基準濃度。
