首都醫科大學| 大黃提取物(RE)通過肥大細胞的聚集和脫粒誘導粘液分泌-技術前沿-資訊-生物在線

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首都醫科大學| 大黃提取物(RE)通過肥大細胞的聚集和脫粒誘導粘液分泌

作者:TG亞太公司 2022-10-28T14:20 (訪問量:10285)


大黃(Rhubarb)屬于蓼科植物,作為中藥(TCM)在臨床上用于治療發燒,腹瀉,解毒和消腫已有數千年的歷史。 除用作瀉藥外,大黃在保護腸道屏障,維持腸道微生態環境和防止腸細菌移位方面也起著重要的作用。 大黃的主要作用歸因于其具有2%-5%的蒽醌類衍生物(包括大黃酸,大黃素,大黃酚,蘆薈大黃素和大黃素甲醚)能夠促進腸道運動和最優含水量,常被用于治療便秘。

眾所周知,大多數由杯狀細胞(GC)分泌的粘蛋白在胃腸道中產生,其關鍵特性是能夠形成凝膠,保護腸道免受感染和促進運動。由于粘蛋白在保護潛在的上皮細胞中起關鍵作用,因此粘液分泌的任何變化都可能改變該防御屏障,具有重要的生理意義。 隨著杯狀細胞移至結腸隱窩,它們通過調節分泌來合成、儲存和分泌粘蛋白(secrete mucin-2)。 類似乙酰膽堿(ACh)和血清素等內源性因素,可以觸發結腸杯狀細胞分泌粘蛋白。

鑒于大黃提取物RE對結腸粘液分泌的具體影響仍然模糊,這項研究的目的是研究RE在結腸GC的粘液分泌及其潛在機制。

研究表明,隨著不同劑量的RE加入伴隨著肥大細胞的累積和增加干擾素(IFN-γ 或3或降低白介素(IL-10 的水平,糞粒的數量和含水量增加。此外,RE可以誘導結腸組織中乙酰膽堿和粘蛋白(mucin-2)的釋放以及糞便中的組胺水平。 以上研究結果表明,RE誘導的結腸粘液分泌影響著肥大細胞活化和某些細胞因子。

此文章于20191218日發表在Scientific Reports上。


在CD79a陽性細胞的識別和分析中,利用TissueGnostics公司StrataQuest軟件對DAB染色進行定量分析。軟件可根據標準陰性對照或操作人員經驗設定cutoff線,隨即自動分析信號和背景強度。軟件的轉錄運算法將形態學信息和多通道類流式分析能力相結合,對虛擬組織切片進行精準的定量分析。結果顯示CD79a總細胞數,陽性細胞數和陽性細胞百分比。(ROI=0.5mmX0.5mm,4個大鼠1組)

在本研究中,DAB染色陽性的CD79+細胞數量較少且分散,且腸上皮細胞在組織中互相擠壓,形態不規則導致細胞質染色區域范圍不等,如何判斷細胞核周邊的細胞質形態,以及區分多個相鄰細胞的細胞質,成為了在組織原位進行定量分析的難題。

TissueFAXS Cytometry技術為首都醫科大學徐敬東老師實驗組補充關鍵實驗數據,2個月時間成功見刊。

TissueFAXS Cytometry定量分析技術,可以在精準識別細胞核的基礎上,以細胞核為核心尋找核周有DAB染色的區域,對區域歸屬進行自動劃分,再結合二維散點圖的正反向即時聯動回溯校驗功能,對有效DAB染色的細胞質區域面積/染色強度進行篩選,最終獲得整張玻片組織中CD79+細胞的百分比。

作為Nature旗下刊物,編輯審核會對文章數據的擁有著極高的要求和標準。傳統病理評估對于散在的不規則信號,主要通過經驗進行若干視野的計算去推測整張樣本的染**況。利用TissueFAXS Cytometry技術,不但可以獲得整張樣本切片的全景分析數據,還極大提高了分析的效率,使研究者更快拿到更準確的分析數據,滿足更高的科研需求。這一切仍然是基于經典的抗原-抗體染色方法,無需額外付出切片染色成本!


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