離開了細胞培養皿,還能愉快做實驗嗎?-技術前沿-資訊-生物在線

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離開了細胞培養皿,還能愉快做實驗嗎?

作者:杭州聯科生物技術股份有限公司 2017-05-05T10:59 (訪問量:5434)

離開了細胞培養皿,還能愉快做實驗嗎?



—— 細胞培養皿的使用須知 ——


培養皿一般用玻璃或塑料制成,是培養微生物或細胞培養的常用實驗耗材,通常玻璃的可以用于植物材料、微生物培養和動物細胞的貼壁培養也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用于植物材料的培養。培養皿易碎,在清洗和使用時要小心輕拿輕放,使用完后要及時清洗干凈,存放在安全、固定的位置。


—— 培養皿的清潔 ——


1、浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應立即浸入清水中備刷洗。

2、刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。

3、.浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質。浸酸不應少于六小時,一般過夜或更長。放取器皿要小心。

4、沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細胞培養的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。


—— 培養皿的分類 ——


1、根據培養皿用途的不同可分為細胞培養皿和細菌培養皿。

2、根據制造材料的不同分為塑料培養皿和玻璃培養皿,但進口培養皿和一次性培養皿大都是塑料材料。

3、根據大小的不同通??煞譃橹睆綖?5mm,60mm,90mm。150mm培養皿。

4、根據分隔的不同又可分為2分隔培養皿,3分隔培養皿等。

5、培養皿材質基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養和動物細胞的貼壁培養也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用于植物材料的培養。


—— 平版培養時為何把培養皿倒置 ——


1、操作時培養皿蓋上可能粘有水珠或者細菌,倒著培養可以避免培養皿蓋上的水珠或者微生物落在培養皿上。

2、培養過程中,細菌在代謝繁殖過程中會產生一些有害于細菌生長繁殖的代謝物,釋放熱量及有水排出,如果不倒著培養會有水珠滴落到培養基中,影響菌落的生長。

3、如果培養目標是收集細菌代謝物,而且代謝物易溶于水,倒著培養可能會方便收集。


培養時培養皿中會產生較多的水蒸氣,水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴,如果培養皿正置,水滴滴下會將菌落沖散,這樣的話一個大菌落可能會分散開成為很多小菌落,對細菌的培養和計數都造成很大的麻煩。如果導致的話,培養基在上,皿蓋在下,水滴滴下不會滴到菌落上。


—— 培養皿使用注意事宜 ——


1、使用前經過清潔消毒,培養皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養基的酸堿度,若有某些化學藥品的存在,會抑制細菌生長。

2、新購的培養皿應先用熱水沖洗,再置于質量分數為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數小時,使游離堿性物質除去,再用蒸餾水沖洗2次。

3、若要培養細菌,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣),120℃的溫度下30min滅菌,置室溫中干燥,或用干熱滅菌,就是將培養皿置于烘箱內,溫度控制在120℃左右的情況下維持2h,即可殺死細菌的胞牙。

4、經過消毒的培養皿才能接種培養使用。

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