代謝組學文獻分享，幾乎每個生物樣本·都有共生菌，你想知道哪些代謝物在菌和宿主間起了作用嗎？
質譜成像技術（mass spectrometry imaging, MSI）結合質譜分析和影像可視化，憑借其樣本處理簡單、能反應多種分子在空間上的分布及分子結構信息而受到高度的關注?？臻g代謝組學描述了自然界中參與代謝表型，防御分子和化學相互作用的小分子的位置和化學性質。代謝組學文獻分享，當前大多數技術無法將宿主與微生物相互作用在空間上顯示出來。
在這里，我們介紹了一個空間代謝組學研究方式（metaFISH），它結合了熒光原位雜交（FISH）顯微鏡技術和高分辨率大氣壓基質輔助激光解吸/電離質譜技術來成像宿主-微生物共生體及其代謝相互作用。
樣本：組織切片后的腐爛芽孢桿菌標本
圖1
AP-MALDI-MSI和FISH在同一組織中的應用可改善空間代謝組學微生物學，可共同鑒定代謝物、宿主與微生物相互作用相關的系統表型（圖1a）。為了分析相關的熒光和代謝物圖像，我們開發了一種基于FISH的空間代謝組別方法，命名為metaFISH。代謝組學文獻分享，我們的metaFISH包含以下三個模塊：（1）示例準備和成像（圖1a，b）；（2）相關處理成像數據（圖1c-f）；（3）使用熒光信號將代謝物分組（圖1g和2c）。我們的檢測提供相關值（metaFISH比率）表明哪些代謝產物來自宿主或共生菌的那些部位。我們使用這些宿主和共生體分配值來解釋通過分子網絡可視化的化學空間并指導液相色譜與串聯質譜（LC–MS / MS）測量以驗證AP-MALDI-MSI數據中注釋的代謝物（圖1g，h）。
圖2
絲長區域覆蓋品紅色的MOX（共生細胞），黃色的SOX（間細胞）和青色的宿主核的DNA染色的FISH圖像，使用AP-MALDI-MSI成像的三種不同分布的代謝物的疊加熱圖。代謝組學文獻分享，品紅，35-氨基細菌膽堿-32,33,34-三醇（ABHTr）；黃色，膦?；掖及飞窠涻０稰nE-Cer（34：2）；青色，磷脂酰膽堿PC（32：1）（圖2b–f），像素大小為3μm的高分辨率AP-MALDI-MSI無法更小尺度的解析細菌細胞（?1μm），但可以區分相同的宿主（圖2j–o）和共生體（圖2p–r）代謝物細菌細胞。 由于較低MSI分辨率上限為3μm，我們無法從統計學上分離兩種共生系統型的亞細胞代謝組。然而，使用FISH顯微鏡，我們可以可視化系統型組成每個細菌細胞群落的組成，并解釋共享的宿主及其內共生體的代謝組（圖2d–r）。
圖3
代謝物檢測了有細菌和無細菌的組織區域。代謝組學文獻分享，metaFISH揭示了代謝組的空間劃分進入細菌定殖和無細菌的亞代謝產物組織。我們對所有分子分布進行了分組將（圖2g）分為七個具有不同生化特征的簇（圖3a，d）。根據對齊的成像數據集，我們通過計算代謝物豐度，面積和重疊的熒光信號強度和面積MF比率作為指標簇是否與無細菌組織或含有共生細菌（圖3b）。我們使用了基于灰度值的圖像分割描繪宿主和共生體的明場和熒光顯微鏡信號。我們的metaFISH分析發現了三個與宿主相關的（MF比率<1）和四個與共生體相關的（MF比率> 1）亞代謝物。
圖4
我們發現氨基細菌膽堿-三醇和氨基細菌類四
參考文獻：
Spatial metabolomics of in situ host-microbe interactions at the micrometre scale.Benedikt Geier，et al. Nat Microbiol 2020 Mar;5(3).