FuGENE? 4K——四步輕松搞定轉染
細胞轉染，是將外源基因導入真核細胞，是用來研究基因表達調控的有效手段。常規轉染技術可分為兩大類：一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（永久轉染）。目前，常用的目的基因導入方法有磷酸鈣沉淀法、電穿孔法、病毒介導轉染、脂質體轉染及顯微注射法等。理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。
幾種常見的轉染方法對比：
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轉染方法 |
原理 |
特點 |
應用 |
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磷酸鈣法 |
磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內吞。 |
不適用于原代細胞，操作簡便但重復性差，有些細胞不適用。 |
穩轉，瞬轉 |
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電穿孔法 |
高脈沖電壓破壞細胞膜電位，DNA通過膜上形成的小孔導入。 |
適用性廣，但細胞致死率高，DNA和細胞用量大。 |
穩轉，瞬轉，所有細胞 |
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病毒介導轉染 |
通過侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中 |
有安全風險；限定宿主細胞。 |
穩轉，特定宿主細胞 |
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陽離子脂質體法 |
帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。 |
適用性廣，轉染效率高，重復性好，但轉染時需除去血清。轉染效果隨細胞類型變化大。 |
穩轉，瞬轉，所有細胞 |
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陽離子聚合物法 |
帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過內吞作用進入細胞。 |
除了具有陽離子脂質體的轉染效率高，操作簡單，適用范圍廣，重復性好等特點外，還具有在體內，轉染效率高，細胞毒性低等特點，是新一代的轉染試劑。 |
穩轉，瞬轉，所有細胞 |
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顯微注射法 |
用顯微操作將DNA直接注入靶細胞核。 |
轉染細胞數有限，多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞 |
穩轉，瞬轉 |
FuGENE? 4K是FuGENE最新研發的最有效的廣譜DNA轉染試劑，它轉染效率高、毒性低、可重復性好，無論是原代細胞、干細胞等難轉染細胞系，還是293和CHO等懸浮細胞，FuGENE?4K都展現出非凡的轉染性能。FuGENE? 4K是FuGENE? HD試劑的升級版，產品性能優于Lipofectamine?3000。僅需1瓶試劑，4步就可輕松搞定轉染實驗，無需添加額外試劑，轉染步驟簡單快速！
STEP 1 轉染當天培養細胞至70%-90%的融合度
STEP 2 準備DNA質粒
將2μg質粒DNA（0.2-1μg/μl）添加到預熱的培養基中并渦旋。
STEP 3 加入FuGENE?4K
按FuGENE?4K轉染試劑：DNA=3:1的比例，將6μl FuGENE?4K試劑直接加入培養基中，立即混合。其他比例，請參考產品說明書。將FuGENE?4K/DNA混合物在室溫下孵育5-15min。
STEP 4 轉染及分析
將FuGENE?4K /DNA混合物加入細胞中，培養24-48小時。分析轉染效率。
產品信息
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名稱 |
貨號 |
規格 |
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FuGENE? 4K DNA Transfection Reagent |
4K-1000 |
1mL |
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4K-5000 |
5mL (5 x 1ml) |
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4K-10000 |
10mL |
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4K-25000 |
25mL |
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4K-50000 |
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