除了RET融合檢測外，其他實體瘤患者可能還需要根據待定臨床試驗的結果進行RET突變檢測，最好通過NGS來完成，如果NGS不可及，可以使用Q-PCR。

目前對RET基因融合檢測的推薦已經在很多國內外指南和共識中有所體現：

• 2020年CSCO非小細胞肺癌診療指南推薦：對不可手術和晚期NSCLC患者進行RET基因檢測，隨著普拉替尼的獲批，檢測應該會從二級推薦升至一級推薦級別。
• 美國NCCN指南也強烈建議除了常見的EGFR、ALK和ROS1外，應進行相對少見驅動基因的廣泛檢測，其中就包括RET融合，有助于鑒定出可以進行相應靶向治療的驅動基因陽性肺癌患者。
• 我國首部《中國非小細胞肺癌RET基因融合臨床檢測專家共識》中也列舉了4類RET檢測的適用人群：（1）強烈推薦所有經病理診斷為肺腺癌（包括含腺癌成分的NSCLC）的晚期患者進行RET基因檢測。（2）推薦經活檢組織病理學證實為非腺癌的晚期NSCLC患者進行RET基因檢測。（3）推薦EGFR-TKI及ALK-TKI耐藥患者進行RET基因融合檢測。（4）推薦術后明確為浸潤性腺癌的患者，除檢測常見驅動基因變異（EGFR、ALK）外，應考慮檢測包括RET基因融合在內其他罕見基因變異。

提高檢測質控意識，規范RET相關基因檢測
在臨床實踐中，多種檢測方式已應用于檢測RET基因融合，但靈敏度和特異度不同，各具有優缺點。目前RET檢測臨床應用最多的是NGS和PCR，FISH則作為第二平臺的驗證非常重要。

NGS檢測分為DNA和RNA水平，RET在 DNA層面上檢測敏感性幾乎可以達到100%，但是部分研究中也存在漏檢，其他一些罕見融合存在假陽性的問題；RNA層面的檢測雖然方便，但是RNA的質量和數量也會影響到檢測結果。

PCR可以實現聯合檢測，通過提取RNA進行多基因檢測,盡管PCR非常方便快速，也存在以下缺點：

• 只能檢測已知融合基因，會有大約2%的罕見融合假陰性
• 檢測需要mRNA，從很少的腫瘤組織中提取RNA具有一定的挑戰性，部分患者樣本不一定能夠滿足檢測要求

隨著普拉替尼的獲批，臨床檢測會越來越多，RET融合檢測亟需規范化。

為了指導臨床檢測獲得準確的結果，使患者得到最大限度的獲益，《中國非小細胞肺癌RET基因融合臨床檢測專家共識》中除了分析常用RET基因融合檢測方法和判讀標準外，也對其檢測流程闡述了注意事項及做好室內外質控的規范化要求：

• 在檢測方法和檢測策略方面，共識強烈推薦的有兩種方法，一個是基于融合表達的、mRNA層面上的RT-PCR，另一個是NGS。
• 檢測醫師應根據送檢標本的類型、數量及質量﹑所檢基因變異類型和數量，以及實驗室條件等合理選擇檢測方式，必要時行多平臺檢測互補和驗證。
• RET基因融合檢測需做好室內外質控，并建立有效的臨床病理溝通機制，使整個檢測流程能夠提高周期性、完整性和全面性。

菁良解決方案
菁良基因的腫瘤融合FFPE標準品，包含RT-PCR驗證的融合表達位點，及數字PCR驗證的基因融合位點，成品為福爾馬林固定，石蠟包埋處理的FFPE切片，主要用于基因融合檢測流程的質量控制和性能驗證。