原發性硬化性膽管炎（PSC）是一種以膽道炎癥和纖維化損傷為特征的進行性膽汁淤積性肝病，但由于其潛在分子機制尚未完全闡明，有效療法仍然有限。2025年12月22日，北京工業大學閻新龍、解放軍總醫院第五醫學中心劉兵、軍事醫學研究院生物工程研究所王友亮、軍事醫學研究院輻射醫學研究所劉曙晨、中國農業大學陳娟團隊聯合在Advanced Science (IF 14.1)上發表文章“Hepatocyte Mettl3 Deficiency Drives Primary Sclerosing Cholangitis and Liver Fibrosis via Cholangiocyte-Macrophage Crosstalk”，發現Mettl3缺陷是PSC發病機制的關鍵驅動因素，表明靶向m6A轉錄組修飾是膽汁淤積性肝病一種有前景的治療策略。

基因信息  Mettl3：m6A甲基轉移酶

實驗動物  5周齡C57BL/6J小鼠

病毒產品  AAV8-TBG-Mettl3，AAV8-control；> 2.0 ×10¹³ VG/mL

注射方式  尾靜脈注射

注射劑量  1.0×10¹¹VG

AAV8-Mettl3增加了Mettl3表達和m6A水平

作者發現肝細胞特異性敲除Mettl3可誘導PSC，特征為進行性纖維化、膽管增生和免疫失調。之后作者通過肝細胞特異性Mettl3敲入和AAV8介導的肝臟Mettl3過表達兩種方法研究了Mettl3在PSC中的作用。在肝細胞特異性Mettl3敲入小鼠（Mettl3^LKI）中，發現Mettl3表達增加，RNA m6A水平升高，ALT、AST、ALP、TBA和TBIL血清水平降低，表明PSC損傷得到改善。組織學評估也表明Mettl3^LKI小鼠對DDC誘導的PSC具有抵抗力。在AAV8介導的肝臟Mettl3過表達小鼠中，同樣發現m6A水平和Mettl3表達增加，羥脯氨酸和血清ALT、AST、ALP和TBA水平降低；IHC分析顯示AAV8-Mettl3治療后DDC誘導的PSC小鼠中膠原蛋白沉積、膽管反應和巨噬細胞浸潤減少；在CCl4誘導的肝纖維化模型中觀察到類似的治療效果，AAV8介導的Mettl3過表達抑制肝纖維化和炎癥。這些發現表明肝細胞特異性Mettl3敲入和AAV8介導的Mettl3過表達均顯著改善了DDC誘導的PSC的進展。

單細胞RNA測序表明Trem2⁺巨噬細胞是Mettl3^△Hep（肝細胞Mettl3缺失）驅動的膽管病微環境重編程的關鍵介質。通路富集分析揭示了白細胞增殖和遷移、細胞-細胞粘附、細胞-基質連接和粘附過程、脂質轉運和脂肪酸代謝激活，批量RNA-seq顯示促炎因子顯著上調，包括細胞因子（Mif、Csf1、Saa1和Saa2）和趨化因子（Ccl3和Cxcl16）及其相應的受體（Cd44、Cd74和Csf1r）對應物。體外細胞實驗證實METTL3通過調節m6A水平來調節MIF、CSF1、SAA1和SAA2的表達，METTL3敲低減少了m6A并上調了這些細胞因子，而其過表達則產生相反的效果。ELISA分析發現HepG2細胞中METTL3敲低增加了MIF分泌，而METTL3過表達顯著抑制其表達；放線菌素D測定進揭示了METTL3敲低后MIF和CSF1 mRNA衰期延長，但METTL3過表達后mRNA加速衰減，表明METTL3通過m6A介導的RNA衰減調節MIF和CSF1的穩定性。這些結果表明METTL3通過m6A甲基化調節肝細胞源性MIF和CSF1的表達，從而促進Trem2+巨噬細胞的募集并促進膽管細胞-巨噬細胞串擾，從而促進PSC進展。

作者通過分子對接分析確定了三種Mettl3激活化合物（MA1、MA2和MA3），并評估了其對PSC的治療效果。發現與對照和其他兩種候選化合物相比，MA3治療顯著增加了總RNA m6A水平并減輕了膽管反應，改善了肝纖維化和血清損傷標志物。在CCl4誘導的肝纖維化中，MA3還可以減弱膠原蛋白沉積、血清 AST和ALT水平以及組織病理學損傷，進一步驗證了其抗纖維化功效。此外MA3治療未能改善Mettl3^ΔHep小鼠中由DDC引起的病理變化，表明MA3的治療效果依賴于肝細胞中Mettl3的表達。這些發現表明，MA3通過針對臨床前模型中的膽管增生、細胞外基質積累和炎癥反應來抑制PSC和肝纖維化。

本研究發現肝細胞Mettl3缺陷通過增強Mif/Csf1的m6A依賴性分泌，導致Trem2⁺巨噬細胞浸潤，進而通過Spp1-Cd44途徑引發致病性膽管細胞巨噬細胞相互作用，從而促進PSC進展?；謴蚆ettl3功能，包括Mettl3^LKI、AAV8介導的過表達或藥理激活，均能有效改善DDC誘導的PSC模型中的膽管反應、纖維化重塑和炎癥反應，為膽汁淤積性肝病提供了一種有前途的治療策略。