CTLA-4抑制T細(xì)胞的作用機制
CTLA-4（細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4）和CD28均為免疫球蛋白超家族的成員，二者與相同的配體CD86(B7-2)和CD80(B7-1)結(jié)合。CTLA-4以同源二聚體形式存在，主要表達(dá)于活化的CD4+、CD8+T細(xì)胞，并結(jié)合表達(dá)于Treg細(xì)胞表面。可作為免疫檢查點并下調(diào)免疫反應(yīng)，是T細(xì)胞反應(yīng)的主要負(fù)調(diào)節(jié)劑。
當(dāng)CTLA-4與抗原呈遞細(xì)胞表面（APC）的CD80、CD86結(jié)合時，CTLA-4充當(dāng)“關(guān)閉”開關(guān)。表達(dá)于Treg表面的CTLA-4對驅(qū)動Treg有重要的功能，聚集于腫瘤組織中抑制抗腫瘤免疫，阻斷CTLA-4后，腫瘤浸潤的Treg功能被鈍化，從而增強瘤內(nèi)免疫應(yīng)答。CTLA-4是維持機體耐受的重要靶點，但造成腫瘤的免疫逃逸的主要原因在于CTLA-4與CD80/CD86的親和力更高，可競爭和阻斷CD28對T細(xì)胞的激活作用。
因此，CTLA-4被認(rèn)為是抑制機體抗腫瘤的免疫分子，是目前腫瘤靶向免疫治療的熱點及方向。
圖1.經(jīng)典的CTLA-4免疫抑制劑作用機制
CTLA-4相關(guān)研發(fā)管線
目前，全球范圍內(nèi)可查的涉及CTLA-4靶點的在研藥物有近百種，治療范圍廣。2011年，百時美施貴寶（BMS）的伊匹木單抗（Lpilimumab）獲美國FDA批準(zhǔn)上市，上市以來已被批準(zhǔn)治療黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、結(jié)直腸癌、肝細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌和胸膜間皮瘤等6個癌種，為CTLA-4靶點藥物市場正式拉開序幕。
BMS除了已經(jīng)推動的伊匹木單抗上市以外，已經(jīng)開始在伊匹木單抗的基礎(chǔ)上布局下一代抗體產(chǎn)品。近期發(fā)表的PH依賴型CTLA-4抗體，是對伊匹木單抗的進(jìn)一步改造，改造后抗體在酸性環(huán)境下具有較強的結(jié)合活性，而在中性環(huán)境中，其結(jié)合能力很大幅度降低。該抗體主要利用腫瘤中較低的PH激活抗體，從而避免抗體系統(tǒng)性的激活免疫系統(tǒng)，從而增加藥物的治療窗口，充分釋放效應(yīng)。
此外，還研發(fā)了BMS-986249和BMS-986288。對BMS-986288還進(jìn)行了去巖藻糖，進(jìn)一步增強了對Treg細(xì)胞的清除能力，目前這兩款藥物已經(jīng)已經(jīng)進(jìn)入臨床。
圖2. pH導(dǎo)向型CTLA-4抗體
阿斯利康開發(fā)的曲美木單抗（Tremelimumab）與Lmfinzi(PD-L1抗體)聯(lián)用治療不可切除的肝癌患者的BLA已被美國FDA接受并將通過有限審評渠道接受評審。
阿斯利康還開發(fā)了PD-1/CTLA-4雙抗MEDI5752，與靶向PD-1和CTLA4的單抗聯(lián)用相比，MEDI5752優(yōu)先在腫瘤中積聚，增強抗腫瘤活性。
2020年6月，貝達(dá)藥業(yè)與Agenus達(dá)成協(xié)議，獲得后者PD-1抑制劑Balstilimab和CTLA-4抑制劑Zalifrelimab的大中華區(qū)權(quán)益，交易金額為3500萬美元預(yù)付款+1億美元里程碑付款+銷售分成。
信達(dá)
今年4月，信達(dá)宣布全人源抗CTLA-4單抗IBI310已被CDE納入突破性治療藥物品種名單（BTD），擬定適應(yīng)癥為與信迪利單抗聯(lián)合用于復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性晚期宮頸癌患者的治療。
2015年康方生物以2億美元的總對價將旗下CTLA-4單抗AK107（quavonlimab，MK1308）授權(quán)給默沙東。
圖3. 康方生物核心技術(shù)平臺
ADG116基于天演藥業(yè)新表位抗體（NEObodyTM）技術(shù)生成，靶向CTLA-4的獨特表位，通過高效清除腫瘤微環(huán)境中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）并柔性阻斷CTLA-4配體結(jié)合而激活T細(xì)胞，旨在增加療效的同時改善產(chǎn)品安全性，有望克服現(xiàn)有的抗CTLA-4療法存在的安全性問題。目前，該藥物獲得美國FDA批準(zhǔn)后已啟動全球Ib/II期試驗（ADG116-P001/ KEYNOTE-C97），評估ADG116與抗PD-1抗體帕博利珠單抗聯(lián)合療法針對晚期/轉(zhuǎn)移性實體腫瘤患者的治療效果。
圖4. ADG116結(jié)構(gòu)
QL1706是齊魯制藥基于其組合抗體技術(shù)平臺（MabPair）研發(fā)的第一個新型PD-1/CTLA-4組合抗體，是一種新的治療藥物和治療模式。它采用創(chuàng)新技術(shù)對CTLA-4抗體的重鏈進(jìn)行了改造，降低了CTLA-4抗體的毒副作用，同時保持高表達(dá)、易純化、高活性、高穩(wěn)定性的特點。此前，該藥已獲得美國FDA批準(zhǔn)開展臨床試驗，并已在中國獲批開展多項臨床試驗。
JS007是君實生物自主研發(fā)的重組人源化抗CTLA-4單克隆抗體，主要用于晚期惡性腫瘤的治療。公開資料顯示，JS007可以特異性地與CTLA-4結(jié)合并有效阻斷CTLA-4與其配體B7（CD80或CD86）的相互作用，從而活化T淋巴細(xì)胞，抑制腫瘤生長。JS007與ipilimumab相比具有相似的安全性，但有更好的療效。
ACROBiosystems開發(fā)了一系列CTLA-4同源二聚體相關(guān)蛋白、生物素化CTLA-4預(yù)偶聯(lián)磁珠、CTLA-4抑制劑篩選試劑盒等系列產(chǎn)品，用于免疫、抗體篩選、質(zhì)控等研究階段，全面助力CTLA-4相關(guān)藥物開發(fā)。
★ 同源二聚體結(jié)構(gòu)經(jīng)SEC-MALS驗證
★ 高純度：經(jīng)SDS-PAGE驗證純度＞95%；經(jīng)SEC-MALS驗證純度＞90%
★ 高生物活性：經(jīng)ELISA/SPR/BLI/FACS驗證，免費提供 Protocol
★ 產(chǎn)品覆蓋Human、Mouse、Cynomolgus、Rhesus macaque、Rabbit等多種屬，F(xiàn)c、His、Avi等多標(biāo)簽，滿足不同的應(yīng)用場景。
>>>高生物活性經(jīng)ELISA驗證
Immobilized Human B7-1, Fc Tag (HPLC-verified) (Cat. No. B71-H5259)at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Human CTLA-4, His Tag (Cat. No.CT4-H5229) with a linear range of 0.2-4 ng/mL (QC tested).
>>>高生物活性經(jīng)BLI驗證
Yervoy(Ipilimumab, Human IgG1) captured on CM5 chip via anti-human IgG Fcantibodies surface, can bind Human CTLA-4, His Tag (Cat. No.CT4-H5229)with an affinity constant of 25.7 nM as determined in a SPR assay(Biacore T200) (Routinely tested).
★ 高捕獲效率：基于鏈霉親和素(SA)和生物素之間極強的親和力，預(yù)偶聯(lián)蛋白磁珠表面包被了飽和濃度的生物素標(biāo)記抗原，結(jié)合能力強，可有效提升捕獲效率
★ 低非特異性結(jié)合：粒徑均勻，形狀規(guī)整，具有超順磁性的磁珠，得到了最低的非特異性結(jié)合
★ 穩(wěn)定、便捷、高效：預(yù)偶聯(lián)蛋白磁珠為凍干狀態(tài)，可長期穩(wěn)定儲存，多次凍融不影響結(jié)構(gòu)和性能。重構(gòu)后即可使用，無需活化，操作簡便，可大大提高您的實驗效率，節(jié)約時間和成本
★ 可用于免疫捕獲、生物淘選、樣品/細(xì)胞富集
Human CTLA-4 coupled Magnetic Beads（Cat. No. MBS-K042）
Immobilized 25.2 μg CTLA-4/1mg Beads can bind Anti CTLA-4 Ab with an EC50 of 1.188 μg/mL (QC tested).
★ 快速便捷：通過使用生物素預(yù)先標(biāo)記的蛋白質(zhì)，消除了耗時的標(biāo)記過程，大大簡化了實驗程序
★ 結(jié)果準(zhǔn)確可靠：抑制劑篩選試劑盒中均包含經(jīng)驗證的中和抗體作為標(biāo)準(zhǔn)陽性對照，保證實驗結(jié)果的有效性
★ 高檢測靈敏度和重現(xiàn)性：基于生物素標(biāo)記平臺生產(chǎn)的具有高檢測靈敏度和低批間差的生物素化蛋白，確保了試劑盒具有所需的檢測靈敏度，并且結(jié)果可高度重復(fù)
★ 可用于多種抑制劑篩選，包括蛋白，多肽，小分子等
★ B7-1[Biotinylated]:CTLA-4抑制劑篩選試劑盒(Cat. No. EP-116)
