在當下抗體藥的競爭格局中,“誰能更快、更準、更穩定地找到高質量抗體克隆”,誰就能在激烈的創新藥賽跑里搶到先機。而這場競賽中最關鍵的一環,是雜交瘤抗體篩選 ——它不是一個普通的實驗步驟,而是影響抗體藥“能否繼續往下走”的首道關卡。從小鼠免疫到雜交瘤融合,再到單克隆抗體篩選,每一步都牽動著研發團隊的神經。而在這條“長跑”中,雜交瘤初篩往往是最耗時、最費力的一段旅程,長期被復雜流程、低通量、假陽性率高、親和力難判定等問題所拖累。
抗體藥開發困境:雜交瘤抗體篩選的"效率魔咒"
雜交瘤技術自1975年問世以來,已成為單克隆抗體制備的經典方法。然而,傳統的雜交瘤抗體篩選過程復雜,需要經歷多次亞克隆和ELISA檢測,往往耗費數周甚至數月時間。盡管 ELISA 等固相法在行業使用多年,但它們逐漸暴露出不適配當今高速度、高通量抗體藥開發的局限:
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操作復雜降低結果可重復性、耗時長、洗滌步驟易導致高背景或信號損失。
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固相吸附改變抗原構象,影響真實結合:固相吸附后抗原構象可能發生改變,可能導致非天然暴露表位、難以評估真實結合能力以及親和力評價結果偏差,難以反映真實性。
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通量有限,難以適應動輒上千克隆的篩選需求:隨著抗體庫變大、靶點多樣化、動物免疫策略升級,雜交瘤克隆數量成倍增長,而傳統方法往往不足以支撐這一速度。
技術矛盾:“效率”與“準確性”必須同時滿足
當前抗體藥研發的趨勢可以總結為三個關鍵詞:
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時間敏感:項目越快推進,越能抓住窗口期
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資源寶貴:研發成本高,容錯率低
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質量為王:抗體篩選必須精準可靠
過去,速度與準確性往往難以兼得——越是快速的篩選,越可能犧牲真實性;越是嚴格的檢測,又可能速度太慢。
而 TR-FRET 技術,正是在這一矛盾點上給出了解決方案,它是近年來快速崛起的均相檢測技術,被廣泛用于抗體藥開發、蛋白相互作用、高通量藥物篩選等場景中。
這一技術的重要價值在于:
> 均相檢測體系,無需分離洗滌步驟,大大簡化實驗流程
> 時間分辨消除自發背景信號
> 適配大規模篩選:96/384/1536孔板均可選,大幅壓縮抗體篩選周期
> 信號強度可直接反映抗體結合能力:TR-FRET的最終信號通常以受體熒光與供體熒光的比值(如665nm/620nm)來表示,不受加樣誤差、熒光淬滅等因素的干擾。
雜交瘤篩選試劑盒(His-抗原)(TR-FRET)如何真正解決問題?

依托于TR-FRET技術平臺,ACROBiosystems百普賽斯已成功開發出雜交瘤抗體篩選試劑盒(His-抗原)(TR-FRET)(Cat. No. FRT-P016),該試劑盒產品可在0.5-1小時內篩選出與His標簽抗原結合的小鼠雜交瘤抗體,還可用于快速測定小鼠雜交瘤細胞上清液中抗體的親和力。
檢測原理
雜交瘤抗體篩選試劑盒基于TR-FRET技術,采用免疫夾心測定法檢測小鼠雜交瘤細胞上清液與其His標簽抗原的結合能力。將銪螯合物標記的單克隆小鼠IgG抗體作為能量供體(Donor),使用特定熒光素FA標記單克隆His標簽抗體作為能量受體(Acceptor)。
? 當檢測樣本中含有目標抗體時,由于小鼠雜交瘤細胞上清液與其His標簽目標抗原的結合,此時能量供體和能量受體非常接近,能量供體在特定光源激發下發出的620nm的信號,該信號被能量受體接收,發出665nm的信號。
? 當檢測樣本中不含有目標抗體時,供體與受體無法相互靠近,從而阻止熒光共振能量轉移的發生。

雜交瘤抗體篩選試劑盒工作原理
為了確保 TR-FRET 雜交瘤篩選獲得穩定、可信的結果,高質量的 His 標簽抗原至關重要。依托于成熟的重組蛋白開發平臺,ACRO可提供數千種具備高純度、高活性及構象正確的His標簽蛋白產品,覆蓋自身免疫性疾病、代謝病、癌癥等多種熱門適應癥靶點。
| TL1A | DLL3 | IL23A & IL12B |
| EGF R | BCMA | VEGF165 |
| IL-2 | IL-4 | CD3E & CD3D |
| Her2 | PD-L1 | Transferrin R |
?? 該試劑盒(FRT-016)設計了嚴謹的對照系統以保障結果的高度特異性和可靠性

In the graph, red represents the positive control samples, orange represents the negative control samples, and green represents the blank buffer controls (without Acceptor).
?? 該試劑盒(FRT-016)具有良好的動態響應范圍和濃度依賴性,能夠穩定反映抗原與抗體的真實結合水平

High-dose effect is a common phenomenon in TR-FRET assays. The optimal antigen concentration and antibody dilution must be determined empirically for each experimental setup.
?? 該試劑盒(FRT-016)具有優異的抗基質干擾能力

The sample demonstrates a clear dose-dependent response across different matrices.
?? 該試劑盒(FRT-016)具有出色的通用性,可廣泛適用于小鼠多種IgG亞型的檢測

This kit is not only suitable for detecting Mouse IgG1, but also for Mouse IgG2a and Mouse IgG2b.
??ELISA與TR-FRET篩選結果的比較——在以下三個案例中,TR-FRET試劑盒對小鼠雜交瘤上清液的篩選結果均與傳統ELISA方法一致。
案例1:

案例2:

案例3:

我們目前可提供多款現貨TR-FRET試劑盒產品,覆蓋多種適應癥熱門靶點,并支持專業定制,讓您的實驗真正做到“開箱即用、一步到位”!

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