日前，由北京大學魏文勝教授領銜的研究團隊，基于circRNA技術開發的新冠疫苗，在小鼠和恒河猴實驗中都誘導出了有效的免疫應答，并且能夠針對不同的新冠病毒變種包括德爾塔（Delta）和奧密克戎（Omicron）提供保護。該項研究在知名學術期刊《細胞》在線發表，可謂一石激起千層浪。 作為近幾年興起的突破性技術，mRNA疫苗通過脂質納米顆粒（LNP）將mRNA導入體內來表達抗原蛋白，以刺激機體產生特異性免疫反應。新冠肺炎疫情（COVID-19）爆發后，針對性的mRNA疫苗在多種疫苗類型中脫穎而出。與此同時，諸如自復制mRNA和circRNA等新型路線也逐漸走入大眾視野。 circRNA分子呈共價閉合環狀結構，不含5’-Cap和3’-polyA結構，不易被RNase降解，具有較高的穩定性。魏教授團隊采用了Group I核酶自催化策略來產生編碼SARS-CoV-2 RBD抗原的circRNA。該種方法是將核心序列插入到環化載體，生成用于體外轉錄（IVT）的模板，產生線性RNA后通過Group I核酶自催化形成circRNA。在RNA環化后需要用RNase R對未環化的RNA進行消化，來達到分離circRNA的目的。
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。 RNase R針對Total RNA、ssRNA及circRNA的消化實驗，實驗證明， RNase R可以消化絕大部分的總 RNA樣品，完全消化ssRNA樣品，對circRNA樣品起到良好的純化效果。
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為了進一步驗證RNase R對環狀RNA無酶切作用，利用qPCR方式檢測經RNase R（藍色：近岸蛋白；綠色：對照品牌）消化后的總RNA樣品中hsa_circKIF12a和hsa_circVapa基因的豐度變化，結果顯示，與陰性組（橙色）相同，兩個基因的豐度基本沒有變化，而經RNase A（粉色）消化的樣品中基因豐度明顯下降，表明環狀RNA耐受RNase R的消化。
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circRNA在生物和生物醫學領域的研究越來越熱，環狀RNA被證實具有多種分子機制，包括調控基因的轉錄和翻譯，調控蛋白質互作甚至可以被翻譯成小肽。不僅如此，環狀RNA還具有轉化醫學價值，它們在作為診斷性生物標志物或疾病治療靶點方面都具有應用潛力。在利用體外環化RNA技術制備針對免疫性疾病或癌癥的環狀RNA藥物方面，也逐步有企業加入進來，目前國內外已有數十家企業布局circRNA技術路線。相信隨著研發推進，circRNA技術會迎來新一波研究和產業化熱潮。
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