環(huán)狀RNA(circRNA)藥物研究風(fēng)生水起,RNase R不可或缺-null-資訊-生物在線

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環(huán)狀RNA(circRNA)藥物研究風(fēng)生水起,RNase R不可或缺

作者:蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司 2022-04-29T15:38 (訪問量:7342)


日前,由北京大學(xué)魏文勝教授領(lǐng)銜的研究團隊,基于circRNA技術(shù)開發(fā)的新冠疫苗,在小鼠和恒河猴實驗中都誘導(dǎo)出了有效的免疫應(yīng)答,并且能夠針對不同的新冠病毒變種包括德爾塔(Delta)和奧密克戎(Omicron)提供保護。該項研究在知名學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》在線發(fā)表,可謂一石激起千層浪。 作為近幾年興起的突破性技術(shù),mRNA疫苗通過脂質(zhì)納米顆粒(LNP)將mRNA導(dǎo)入體內(nèi)來表達(dá)抗原蛋白,以刺激機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。新冠肺炎疫情(COVID-19)爆發(fā)后,針對性的mRNA疫苗在多種疫苗類型中脫穎而出。與此同時,諸如自復(fù)制mRNA和circRNA等新型路線也逐漸走入大眾視野。 circRNA分子呈共價閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu),不含5’-Cap和3’-polyA結(jié)構(gòu),不易被RNase降解,具有較高的穩(wěn)定性。魏教授團隊采用了Group I核酶自催化策略來產(chǎn)生編碼SARS-CoV-2 RBD抗原的circRNA。該種方法是將核心序列插入到環(huán)化載體,生成用于體外轉(zhuǎn)錄(IVT)的模板,產(chǎn)生線性RNA后通過Group I核酶自催化形成circRNA。在RNA環(huán)化后需要用RNase R對未環(huán)化的RNA進行消化,來達(dá)到分離circRNA的目的。
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圖1:circRNA制備模板及環(huán)化后結(jié)構(gòu)示意圖(本圖引自文章Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants)

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RNase R來源于大腸桿菌RNR超家族,是一種鎂離子依賴性的3'—5'核糖核酸外切酶,可從3'—5'方向?qū)NA逐步切割成二核苷酸和三核苷酸。RNase R幾乎能夠消化所有線性的RNA,但不易消化環(huán)狀RNA、套索結(jié)構(gòu)RNA和3'端突出少于7個核苷酸的短雙鏈RNA分子。通常用來消化線性RNA以富集circRNA或套索結(jié)構(gòu)RNA。 近岸蛋白經(jīng)過系列驗證,重磅推出高活性?RNase R(貨號:E224
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RNase R針對Total RNA、ssRNA及circRNA的消化實驗,實驗證明, RNase R可以消化絕大部分的總 RNA樣品,完全消化ssRNA樣品,對circRNA樣品起到良好的純化效果。

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為了進一步驗證RNase R對環(huán)狀RNA無酶切作用,利用qPCR方式檢測經(jīng)RNase R(藍(lán)色:近岸蛋白;綠色:對照品牌)消化后的總RNA樣品中hsa_circKIF12a和hsa_circVapa基因的豐度變化,結(jié)果顯示,與陰性組(橙色)相同,兩個基因的豐度基本沒有變化,而經(jīng)RNase A(粉色)消化的樣品中基因豐度明顯下降,表明環(huán)狀RNA耐受RNase R的消化。

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circRNA在生物和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究越來越熱,環(huán)狀RNA被證實具有多種分子機制,包括調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,調(diào)控蛋白質(zhì)互作甚至可以被翻譯成小肽。不僅如此,環(huán)狀RNA還具有轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)價值,它們在作為診斷性生物標(biāo)志物或疾病治療靶點方面都具有應(yīng)用潛力。在利用體外環(huán)化RNA技術(shù)制備針對免疫性疾病或癌癥的環(huán)狀RNA藥物方面,也逐步有企業(yè)加入進來,目前國內(nèi)外已有數(shù)十家企業(yè)布局circRNA技術(shù)路線。相信隨著研發(fā)推進,circRNA技術(shù)會迎來新一波研究和產(chǎn)業(yè)化熱潮。

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相關(guān)產(chǎn)品

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貨號 產(chǎn)品名稱
E224 RNase R
E131 T7 High Yield RNA Transcription kit
GMP-E121 T7 RNA Polymerase, GMP Grade
GMP-E125 RNase Inhibitor, GMP Grade
GMP-M036 Pyrophosphatase, Inorganic (yeast), GMP Grade

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蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司,是一家專注于重組蛋白應(yīng)用解決方案的高新技術(shù)企業(yè),主營業(yè)務(wù)為靶點及細(xì)胞因子類蛋白、重組抗體、酶及試劑的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)。公司定位為醫(yī)療健康與生命科學(xué)領(lǐng)域原料與技術(shù)解決方案的上游供應(yīng)商,致力于為下游客戶提供及時、穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù),助力全球生物醫(yī)藥企業(yè)和研究機構(gòu)的技術(shù)與產(chǎn)品創(chuàng)新升級。

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