分鐘級精準快檢,破解基孔肯雅熱防控難題!-技術前沿-資訊-生物在線

分鐘級精準快檢,破解基孔肯雅熱防控難題!

作者:蘇州近岸蛋白質科技股份有限公司 2025-07-30T00:00 (訪問量:28579)

2025年7月24日,廣東省佛山五區衛生健康局通報,佛山全市累計報告基孔肯雅熱確診病例3645例。為應對疫情,佛山市多個區縣發布《告全體市民書》,號召公眾積極行動,及時清除蚊蟲,殺滅成蚊。

相信這幾天大家已經從各個途徑了解了基孔肯雅熱是什么了,那我們我們來說一說如何預防。目前沒有針對基孔肯雅熱的抗病毒藥物,也無疫苗可預防,所以防蚊滅蚊、避免叮咬是防護的關鍵。基孔肯雅熱的潛伏期一般是1至12天,通常是3至7天。所以研發快速、靈敏且特異的早期診斷技術至關重要,唯有實現早發現與早干預,方能有效阻斷疾病傳播鏈,將疫情防控在一線,切實維護公眾健康。

01 一管法qPCR mix,直接加入引物模板即可

近岸蛋白推出的適用于RNA模板的一步法多重熒光定量qRT-PCR檢測試劑盒(目錄號:E695)。特殊工藝處理的熱啟動Taq DNA聚合酶和熱穩定逆轉錄酶,能夠在更快速的程序下進行高性能多重擴增。

產品優勢

1)快速擴增:能夠實現30min擴增,提高檢測效率;

2)高靈敏度:可進行對低濃度樣本檢出;

3)多重檢測:同一反應管中可同時進行4-6個靶標的檢測;

4)高耐受性:可適用于血液、唾液等各種復雜樣本環境;

5)防污染體系:體系中添加dUTP/UDG防污染系統,降低假陽性。

性能展示

01 穩定性好

使用近岸蛋白E695進行37℃加速實驗,以293細胞RNA為模板(100ng,10ng,1ng,100pg)。加速處理后的試劑跟-20℃保存的試劑對比發現,兩者的擴增曲線基線平穩,拐點清楚,指數期明顯,曲線整體平滑,具有較好的穩定性。

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圖1 加速穩定性測試

02 耐受性好

在反應體系配制的時候,加入1μl10%全血作為雜質背景驗證擴增的耐受性。使用近岸蛋白E695驗證常規體系和耐雜體系對模板的擴增。結果發現,常規體系與耐雜體系的擴增曲線高度吻合(30min內陽性樣本檢出率維持穩定-Ct值偏差≤0.5),且反應體系未出現非特異性擴增條帶或假陽性信號,表現出優異的一致性。

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圖2 常規體系和耐雜體系比較

 

02 LAMP讓檢測更簡單,讓“兇手”現形一線

LAMP技術,以其顛覆性的優勢(恒溫操作、檢測時間快以及對實驗室基礎設施要求低等優勢)在POCT領域脫穎而出,讓核酸檢測變得更快速、更簡便、更經濟、更易于在基層和現場部署!

近岸蛋白可提供全系列的LAMP檢測試劑。以RNA樣本為主的兩款檢測試劑盒助力分子診斷POCT即時快檢產品開發-顯色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(目錄號:FLE228),熒光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(目錄號:E220),其中,FLE228試劑盒均不含甘油及其他影響凍干的成分,包含保護劑、賦形劑等試劑,可用于凍干樣品的制備。

產品優勢

1)操作簡單:簡化試劑添加過程,縮短時間;

2)擴增速度快:通常在30min內便可得到擴增結果;

3)可凍干:兩款產品均可用于制作凍干粉或凍干小球;

性能展示

顯色法的2×Indicator RT-LAMP Master Mix with Dye (for-Lyo)(FLE228)

01 優異的反應性能

FLE228為紅黃變色反應,在擴增完成后,陽性結果為黃色,陰性結果為紅色,通過肉眼觀察即可對反應結果進行判讀。以SARS-CoV2 ORF1ab基因,靈敏度可達到100fg/Test;NTC沒有顯示出擴增信號,表明反應體系具有良好的特異性,沒有非特異性擴增。

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圖3  SARS-CoV2 ORF1ab基因檢測

02 客戶實測

客戶使用FLE228的核心酶自研搭建反應體系。經過兩次凍干復溶后檢測,發現前后陽性檢測時間差異不大,25min即可穩定判讀結果。

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圖4 客戶實測結果展示

 

熒光染料法的2×RT-LAMP Kit with Dye(E220)

01 優異的反應性能

分別以SARS-CoV2 ORF1ab基因和N基因為靶標,同時和供應商N的產品一起檢測。結果顯示SARS-CoV2 N基因,靈敏度均可達到5×102copies/Test;SARS-CoV2 ORF1ab基因,靈敏度均可達到1×103copies/Test;反應時間上E220快于供應商N(陽性Ct值大大提前);同時NTC沒有顯示出擴增信號,表明反應體系具有良好的特異性,沒有非特異性擴增。

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圖5 SARS-CoV2 ORF1ab/N基因檢測

02 客戶實測

客戶樣本為甲流國家參考品及咽拭子真實樣本,臨床樣本投入量大約是5ng。測試結果發現,E220比供應商N、供應商Y的擴增效率要高,和供應商X的起峰時間差不多,但E220的信號值更高。

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圖6 客戶實測結果展示

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