核酸檢測,作為精準醫療的“火眼金睛”,近年來在IVD領域,尤其是分子診斷POCT(即時檢驗) 上發展迅猛。當前核酸檢測的主要是 qPCR技術。它憑借超高的特異性、靈敏度以及定量能力,被公認為分子檢測的“金標準”,也是實現高通量檢測的利器。然而,在過程中依賴變溫qPCR儀器、檢測耗時長以及特定實驗室環境的要求極大地限制了qPCR技術在基層醫療機構推廣和現場快速檢測中的應用。LAMP技術,以其顛覆性的優勢(恒溫操作、檢測時間快以及對實驗室基礎設施要求低等優勢)在POCT領域脫穎而出,讓核酸檢測變得更快速、更簡便、更經濟、更易于在基層和現場部署!
近岸蛋白LAMP探針法試劑盒LAMP Fast Probe Kit(目錄號:E323),采用經基因工程改造的 Bst 2.0 plus DNA 聚合酶(目錄號:E033),搭配特殊優化的反應體系
,可高特異性、高靈敏度地實現探針法LAMP,能夠用于檢測樣品中的 DNA。與Bst 2.0 DNA聚合酶相比,Bst 2.0 plus DNA聚合酶表現出更高的擴增速度、產量和靈敏度等優點。配合優化的反應緩沖液,可抑制非特異性擴增,顯著提升擴增效率,只需加入引物探針和模板即可, 通常在30 min內便可得到擴增結果。檢測通過熒光信號實時監測,靈敏度高,重復性好。
產品三大亮點
分鐘級快檢
30分鐘內獲得指數級擴增,熒光信號同步釋放
零背景干擾
探針精準切割,假陽性無處藏身
多重應用
適配病原體檢測,多重場景精準覆蓋
性能展示
01 高效的擴增性能
以嗜熱芽孢桿菌基因組(GC~50%)為模板進行10倍梯度稀釋,使用近岸蛋白E323和市售品牌A同類產品進行檢測。結果顯示,近岸蛋白E323的反應速度快于品牌A;檢測靈敏度上,近岸蛋白E323和品牌A均能檢測到10 copies/test 靶標DNA。

圖1紅色曲線:近岸蛋白E323;粉紫色曲線:品牌A。濃度梯度依次為:1-1.0E05 copies/Test、2-1.0E04 copies/Test、3-1.0E03 copies/Test、4-1.0E02 copies/Test、5-1.0E01 copies/Test、6-NTC
02 高特異性
對2份無酶水進行檢測,24個重復均無異常起峰,排除假陽性干擾。因此近岸蛋白E323在抑制非特異擴增上性能更好。

圖2 陰性水(NTC)對照檢測
03 重復性好
以嗜熱芽孢桿菌基因組(GC~50%)為模板1.0E03 copies濃度下做10次重復試驗。結果顯示,所有擴增曲線擬合度高,表明擴增效率一致;CV值均小于3%,表明實驗具有良好的重復性和數據一致性,檢測結果穩定可靠。

圖3 近岸蛋白E323的重復性試驗結果
04 穩定性
在LAMP體系中測試E323熱加速后的試劑與-20℃正常保存試劑的性能。結果顯示:E323試劑經37℃熱加速處理7天的檢測性能與-20℃保存的試劑高度吻合(陽性樣本檢出率維持穩定-Ct值偏差≤0.5),且反應體系未出現非特異性擴增條帶或假陽性信號,表現出優異的穩定性。

圖4 近岸蛋白E323的加速穩定性試驗結果(紅色曲線:E323 37℃ 7d;綠色曲線:E323-20℃)
近岸蛋白解決方案
面對將樣品運輸到專業實驗室成本高昂、地理位置不便、存在時間敏感等限制的情況,為了滿足客戶對多元化POCT解決方案的持續需求,近岸蛋白推出了基于恒溫擴增LAMP的系列產品(LAMP檢測方法選擇指南,近岸蛋白解鎖“快準穩”全場景方案)。為了讓大家更好的選擇合適的產品,從方法學上整理出了不同產品之間的差異,大家可根據需求選擇適合的產品。
產品信息

