在生物醫(yī)藥行業(yè)中，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廣泛應(yīng)用于新藥研發(fā)、疾病研究和基礎(chǔ)研究。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在新藥的研發(fā)過(guò)程中具有重要作用，能夠模擬人類(lèi)疾病，降低風(fēng)險(xiǎn)，提高效率，確保藥物的安全性和有效性。近岸蛋白提供神經(jīng)疾病研究及皮膚炎癥領(lǐng)域造模所需的熱門(mén)重組蛋白，目前已服務(wù)海內(nèi)外數(shù)十家客戶(hù)。動(dòng)物造模蛋白產(chǎn)品覆蓋多發(fā)性硬化癥(multiple sclerosis，MS) 、帕金森疾病(Parkinson disease，PD)等神經(jīng)疾病模型，以及銀屑病(Psoriasis) 、特異性皮炎(atopic dermatitis，AD) 等皮膚炎癥模型。
多發(fā)性硬化癥-EAE模型
多發(fā)性硬化癥是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性炎癥性疾病，其主要病理改變?yōu)橹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)（CNS）白質(zhì)脫髓鞘，最終會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡。研究者認(rèn)為，不僅髓鞘特異性 CD4+T 細(xì)胞攻擊中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘介導(dǎo)了 MS 的發(fā)生，而且 B 細(xì)胞作為抗原遞呈細(xì)胞（APCs）、產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子和趨化因子以及分泌針對(duì)髓鞘和軸突的自身抗體也都起著重要作用[1]。CD20 單抗 Ofatumumab 已于 2020 年和 2021 年分別獲得美國(guó) FDA 和歐盟的批準(zhǔn)，它通過(guò)結(jié)合 B 細(xì)胞表面的 CD20 分子并誘導(dǎo)有效的 B 細(xì)胞溶解和耗盡而發(fā)揮作用，用于治療成人復(fù)發(fā)性多發(fā)性硬化癥，展現(xiàn)出針對(duì) B 細(xì)胞相關(guān)靶點(diǎn)，尤其是 B 細(xì)胞耗竭療法在 MS 治療中的巨大潛力。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE) 模型是多發(fā)性硬化癥的常用動(dòng)物模型。這個(gè)模型通過(guò)引起小鼠或者大鼠免疫系統(tǒng)攻擊其自身神經(jīng)組織而導(dǎo)致神經(jīng)損傷和癥狀。
近岸蛋白自主研發(fā)重組人MOG1-125蛋白，純度＞95%，不僅被國(guó)內(nèi)頭部藥企和CRO公司廣泛選用，適用于各種模式動(dòng)物EAE疾病建模，尤其是針對(duì)B細(xì)胞相關(guān)靶點(diǎn)的模型研究。
MOG(MOG1-125)參考免疫策略
在誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）時(shí)，將100μg MOG 1-125通過(guò)超聲乳化的方式混入添加了5mg/mL的結(jié)核分枝桿菌的不完全弗氏佐劑中。小鼠在第0天接受皮下注射該乳化劑，并且在第0天和第2天接受腹腔注射300ng的百日咳毒素。每2天檢測(cè)一次臨床評(píng)分和體重，直至出現(xiàn)癥狀，之后則改為每日檢測(cè)[2]。
相關(guān)產(chǎn)品
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Cat.No. |
Product Name |
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C565 |
Recombinant Human MOG (C-6His) |
帕金森疾病模型-PD模型
帕金森病是最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病之一，其主要病理變化是黑質(zhì)致密部中多巴胺能神經(jīng)元進(jìn)行性丟失且伴有α-突觸核蛋白 (alpha-Synuclein，SNCA)為主要成分的路易小體的形成。相比于使用神經(jīng)毒素（如6-OHDA和MPTP）殺傷多巴胺神經(jīng)元的帕金森模型，基于alpha-Synuclein的帕金森病模型由于在時(shí)程上能夠較好地模擬帕金森病發(fā)生、發(fā)展的全過(guò)程，這有利于發(fā)現(xiàn)和識(shí)別新的治療靶點(diǎn)。
近岸蛋白提供超低內(nèi)毒素(<0.05 EU/mg),純度＞95%的alpha-Synuclein蛋白，用于帕金森疾病建模。該alpha-Synuclein單體可在體外制備預(yù)制纖維（PFFs），通過(guò)腦立體定位注射的方式將PFFs注射進(jìn)腦內(nèi)，可誘發(fā)內(nèi)源alpha-Synuclein的聚集、磷酸化和泛素化反應(yīng)，適用于驅(qū)動(dòng)路易小體形成和擴(kuò)散的藥物機(jī)制研究，以及適用于阻斷該過(guò)程化合物的篩選和有效性驗(yàn)證。
alpha-Synuclein參考免疫策略
重組人alpha-Synuclein按照已發(fā)表的方案被制成纖維狀[3]，并制備成預(yù)成型纖維（PFFs）以便用于體內(nèi)給藥。alpha-Synuclein PFF和單體溶液的最終濃度為2μg/μL。采用無(wú)菌技術(shù)，用異氟烷對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉并為立體定向手術(shù)做準(zhǔn)備。當(dāng)分兩次給藥共注入10μg PFFs，以0.5μL/min的速度在AP +0.3、ML +2.2mm、DV -3.0mm及 -4.0mm處注入2.5μL體積中含5μg PFFs的溶液[4]。
相關(guān)產(chǎn)品
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Cat.No. |
Product Name |
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CF66-A |
Recombinant Human monomeric alpha-Synuclein |
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CF66 |
Recombinant Human monomeric alpha-Synuclein |
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CH45 |
Recombinant Human alpha-Synuclein (N-6His) |
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CM23 |
Recombinant Mouse alpha-Synuclein |
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CK23 |
Recombinant Mouse alpha-Synuclein (N-6His) |
銀屑病模型-Psoriasis模型
銀屑病是一種常見(jiàn)的慢性炎癥性疾病，臨床表現(xiàn)為紅斑、斑塊、鱗屑的慢性炎癥性皮膚病。在各種細(xì)胞因子注射小鼠模型中，注射IL-23是最為常見(jiàn)的建模方式[5]。小鼠耳廓皮內(nèi)注射IL-23可通過(guò)IL-23/Th17軸誘發(fā)炎癥。IL-23激活下游反應(yīng)誘導(dǎo)分化Th17細(xì)胞，分泌的IL-17和IL-22作用于角質(zhì)形成細(xì)胞等引起皮膚細(xì)胞的炎癥損傷。目前，細(xì)胞因子模型誘導(dǎo)銀屑病易使用、能夠與其他各種基因工程小鼠模型聯(lián)合使用、建模時(shí)間較短，靶點(diǎn)通路明確等優(yōu)點(diǎn)。向小鼠皮膚注射IL-23、IL-12、IL-36、IL-22和IL-33已被應(yīng)用于誘導(dǎo)銀屑病樣皮膚炎癥。
近岸蛋白不僅提供IL-23細(xì)胞因子用于銀屑病造模。IL-33和IL-36等細(xì)胞因子也被用于皮膚炎癥建模，助力靶向皮膚炎癥的藥物開(kāi)發(fā)。
IL-23參考免疫策略(耳部）
使用無(wú)菌PBS將rIL-23儲(chǔ)備液稀釋至工作濃度為25ng/μL，每只小鼠每次注射需要20μL。麻醉小鼠后，將30號(hào)針頭從根部彎曲90度，然后將針頭插入耳部，盡量以較淺的角度使針頭斜面朝上，以便將溶液注射到真皮層。每隔一天進(jìn)行一次耳部厚度測(cè)量和皮內(nèi)注射，計(jì)算注射rIL-23耳朵相對(duì)于第一天耳部厚度的變化。在每次注射rIL-23之前，應(yīng)對(duì)每只處于麻醉狀態(tài)的小鼠進(jìn)行一次耳部厚度測(cè)量[6]。
IL-23參考免疫策略(背部）
小鼠麻醉后，使用電動(dòng)推剪或脫毛膏將小鼠背部毛發(fā)剃除。三天后進(jìn)行rIL-23的注射。為此，首先將小鼠rIL-23儲(chǔ)備液在無(wú)菌PBS中稀釋至工作濃度為25ng/μL，每次注射需要20μL，每只小鼠注射2次。將30號(hào)針頭從根部彎曲 90 度，然后將針頭以盡可能淺的角度，斜面朝上插入皮膚，以便將溶液注入真皮層。以緩慢、連續(xù)的動(dòng)作在背部?jī)蓚?cè)的兩個(gè)部位分別注射 20μL含 500 ng rIL-23 的溶液或 20 μL PBS 對(duì)照溶液（每只小鼠總計(jì) 1 μg）每天進(jìn)行皮內(nèi)注射，一般第四天會(huì)出現(xiàn)銀屑病樣變化，第五天開(kāi)始炎癥會(huì)有所減輕[6]。
相關(guān)產(chǎn)品
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Cat.No. |
Product Name |
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CJ40 |
Recombinant Human IL-23(C-6His) |
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C03U |
Recombinant Mouse IL-23 |
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C091 |
Recombinant Human IL-33 |
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CG73 |
Recombinant Mouse IL-33 |
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CR61 |
Recombinant Human IL-36 alpha |
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CR57 |
Recombinant Human IL-36 beta |
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CM77 |
Recombinant Human IL-36 gamma |
除造模蛋白外，近岸蛋白同時(shí)提供實(shí)驗(yàn)所需的IgG1/4同型對(duì)照及180+陽(yáng)參抗體，還可提供技術(shù)支持和模型構(gòu)建相關(guān)重組蛋白定制服務(wù)，歡迎咨詢(xún)！
相關(guān)產(chǎn)品：IgG1/4同型對(duì)照抗體
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Cat.No. |
Product Name |
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NC002 |
Human IgG1 control Antibody |
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NC003 |
Human IgG4 control Antibody |
參考文獻(xiàn)
[1] Hauser SL, Waubant E, Arnold DL, Vollmer T, Antel J, Fox RJ, Bar-Or A, Panzara M, Sarkar N, Agarwal S, Langer-Gould A, Smith CH; HERMES Trial Group. B-cell depletion with rituximab in relapsing-remitting multiple sclerosis. N Engl J Med. 2008 Feb 14;358(7):676-88. doi: 10.1056/NEJMoa0706383. PMID: 18272891.
[2] Faust MA, Gibbs L, Oviedo JM, Cornwall DH, Fairfax KC, Zhou Z, Lamb TJ, Evavold BD. B Cells Influence Encephalitogenic T Cell Frequency to Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)38-49 during Full-length MOG Protein-Induced Demyelinating Disease. Immunohorizons. 2024 Sep 1;8(9):729-739. doi: 10.4049/immunohorizons.2400069. PMID: 39330967; PMCID: PMC11447661.
[3] Polinski NK, Volpicelli-Daley LA, Sortwell CE, Luk KC, Cremades N, Gottler LM, Froula J, Duffy MF, Lee VMY, Martinez TN, Dave KD. Best Practices for Generating and Using Alpha-Synuclein Pre-Formed Fibrils to Model Parkinson's Disease in Rodents. J Parkinsons Dis. 2018;8(2):303-322. doi: 10.3233/JPD-171248. PMID: 29400668; PMCID: PMC6004926.
[4] Gentzel RC, Toolan D, Jinn S, Schachter JB, Ma L, Kahle PJ, Smith SM, Marcus JN. Intracranial administration of alpha-synuclein fibrils in A30P-synuclein transgenic mice causes robust synucleinopathy and microglial induction. Neurobiol Aging. 2021 Oct;106:12-25. doi: 10.1016/j.neurobiolaging.2021.05.012. Epub 2021 Jul 3. PMID: 34225000.
[5] Chan JR, Blumenschein W, Murphy E, Diveu C, Wiekowski M, Abbondanzo S, Lucian L, Geissler R, Brodie S, Kimball AB, Gorman DM, Smith K, de Waal Malefyt R, Kastelein RA, McClanahan TK, Bowman EP. IL-23 stimulates epidermal hyperplasia via TNF and IL-20R2-dependent mechanisms with implications for psoriasis pathogenesis. J Exp Med. 2006 Nov 27;203(12):2577-87. doi: 10.1084/jem.20060244. Epub 2006 Oct 30. PMID: 17074928; PMCID: PMC2118145.
[6] Singh TP, Zhang HH, Hwang ST, Farber JM. IL-23- and Imiquimod-Induced Models of Experimental Psoriasis in Mice. Curr Protoc Immunol. 2019 Jun;125(1):e71. doi: 10.1002/cpim.71. Epub 2019 Jan 7. PMID: 30615272.