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| 重組腸激酶(Enterokinase、EK酶) | |
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一、重組腸激酶說明
腸激酶(Enterokinase, light chain)是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉變為胰酶,也可以將帶有這個識別序列的融合蛋白切開。由于腸激酶具有高度專一性,水解效率高的特點,它被廣泛地應用于基因工程產品的開發,其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業及基因工程、生物化學、分子生物學等研究。
二、 產品優勢
優勢1:專業的重組蛋白生產工藝,由酵母分泌表達的高純度、高活性的重組牛腸激酶。
優勢2:經多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測目的帶單一清晰;不含非特異性的蛋白酶切活性。
優勢3:高活性,0.03U的EK酶16小時即可將15μg的Thioredoxin-NP-27切割完全。
優勢4:,適用范圍廣(4-45℃,pH4.5-9.5),在各種去垢劑和變性劑存在下仍具有部分活性。
優勢5:切割后蛋白的N端與天然蛋白N端相同。
三、反應條件
1×重組牛腸激酶反應緩沖液:
50mM Tris-HCl,pH 8.0(22℃),1mM CaCl2,0.1% Tween-20。
四、應用實例

圖例 重組牛腸激酶酶切反應:
每個反應含有15μg的Thioredoxin-NP-27和不同數量的腸激酶。在37℃經過16小時的反應后用15℃的SDS-PAGE膠檢測酶切效果。每個反應所含的酶量分別為:
Lane A: No rEK Lane B: 0.0008 units Lane C: 0.0015 units Lane D: 0.003 units
Lane E: 0.008 units Lane F: 0.015 units Lane G: 0.03 units
