多肽是以氨基酸為基本單位縮合連接而成，具有一定生物活性的化合物分子，分子量一般在10KDa以下。相對于蛋白質(zhì)具有空間結(jié)構(gòu)較為簡單、穩(wěn)定性較高、作用濃度低及免疫原性較低等特點[1]；多肽藥物包括：激素類多肽及其衍生藥物、天然多肽藥物、多肽疫苗、PDC（peptide-drug conjugates）多肽藥物等；多肽藥物活性高、用量少、特異性強、不良反應(yīng)少，上世紀(jì)60年代以來，已經(jīng)有超過80種多肽藥物走上臨床，多肽激素在臨床上廣泛應(yīng)用；胰島素（如圖1）是第一款在臨床上應(yīng)用的多肽藥物，為I型糖尿病治療帶來了革命性的變化。
常用檢測方法
多肽類常用的生物樣品分析方法主要有液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）、配體結(jié)合分析法（LBA）及LBA-LC-MS /MS聯(lián)用法。
LBA 作為分析多肽藥物的最常用方法，是基于抗體對分析物/抗原的特異性識別來進(jìn)行定量分析目標(biāo)多肽，主要包括酶聯(lián)免疫檢測法ELISA( enzyme-linkedimmunosorbent assay) 、放射免疫分析法RIA( radioimmunoassay) 、電化學(xué)發(fā)光( MSDmeso scale discovery) 等。ELISA 與其他檢測方法相比，具有成本低、操作簡單、快速、靈敏度高、通量大、無放射性危害等優(yōu)點。但是，LBA 應(yīng)用于多肽藥物分析也呈現(xiàn)出一些不足，如特異性試劑的制備困難且價格高昂，無法排除內(nèi)源性類似物及其代謝物的干擾等。
LC-MS/MS具有選擇性好、時間短、成本低、特異性強、高通量等優(yōu)點，在臨床前先導(dǎo)化合物篩選階段，具有很強的優(yōu)勢。但同樣面臨很多挑戰(zhàn)，包括非特異性吸附、內(nèi)源性干擾、穩(wěn)定性差等；但是通過優(yōu)化樣品前處理方法、優(yōu)化色譜質(zhì)譜條件等能有效解決，LC-MS/MS成為多肽類藥物生物分析比較好的選擇。
LBA-LC-MS /MS聯(lián)用法( hybrid ligand binding with LC-MS /MS，LBLC-MS /MS)，將LC-MS /MS 技術(shù)與LBA 的免疫親和捕獲相結(jié)合形成LBA-LC-MS /MS聯(lián)用法，是利用特異性或非特異性試劑將待測物從生物樣品中提取、富集后，使用LC-MS /MS 方法測定待測物濃度。該方法因為高效的免疫捕獲手段，具有高靈敏度和高選擇性等優(yōu)點。