針對(duì)上述幾個(gè)方面，近岸蛋白綜合多年來(lái)原料及工藝進(jìn)化經(jīng)驗(yàn)，提供經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證的質(zhì)量分析方案及試劑。其中，mRNA加帽率檢測(cè)通過(guò)了中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（CNAS）評(píng)審認(rèn)定，并發(fā)放認(rèn)可決定書。

為滿足mRNA疫苗企業(yè)的原液檢測(cè)需求，近岸蛋白推出dsRNA ELISA Kit，可配套檢測(cè)mRNA原液中dsRNA的含量情況，解決原液質(zhì)檢問(wèn)題。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)dsRNA, 可以高靈敏、特異性地檢測(cè)和定量分析mRNA中的dsRNA殘留量。

1. 檢測(cè)時(shí)間縮短至1.5小時(shí)。

2. 檢測(cè)線性范圍：0.047-3 ng/ml。

在mRNA疫苗藥物的生產(chǎn)過(guò)程中，T7 RNA聚合酶作為整個(gè)反應(yīng)體系的核心酶，根據(jù)規(guī)定，需要對(duì)其進(jìn)行殘留檢測(cè)，本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)T7 RNA聚合酶，可以高靈敏度、高特異性地檢測(cè)和定量分析mRNA原液中的T7 RNA聚合酶殘留。

1. 靈敏度高，達(dá)0.25 ng/ml。

2. 檢測(cè)線性范圍：0.25-16 ng/ml

近岸蛋白重磅推出磁珠法樣品處理完整試劑盒（目錄號(hào)：CD001），涵蓋所有加帽率樣品處理所需試劑，用戶只需要準(zhǔn)備mRNA樣品即可。

經(jīng)典磁珠法樣品處理流程：

1. 一步完成探針結(jié)合與酶切，操作簡(jiǎn)便快速，全流程僅需1.5-2小時(shí)

2. 特殊的裂解探針設(shè)計(jì)思路有效減少次裂解產(chǎn)物形成，便于后續(xù)加帽率檢測(cè)結(jié)果分析

3. 酶切mix穩(wěn)定性強(qiáng)，37℃ 21天，反復(fù)凍融150次，酶切活性無(wú)影響

同時(shí)，在方法學(xué)的探索中，近岸蛋白永不止步，開發(fā)出創(chuàng)新快速加帽率樣品處理試劑盒（目錄號(hào)：CD002），并提交了發(fā)明專利申請(qǐng)（申請(qǐng)?zhí)枺?02311212061X）。在該方法中，無(wú)需生物素化探針，沉淀液替代磁珠，更低成本完成加帽率檢測(cè)樣品處理。探針與目標(biāo)mRNA退火形成DNA/RNA雜交雙鏈后，引導(dǎo)RNase H在特定位置切割mRNA。再利用特殊優(yōu)化配制的沉淀液可有效回收5’端酶切片段，操作簡(jiǎn)便快速，處理后的樣本可直接用于LC-MS系統(tǒng)下的加帽率檢測(cè)。

創(chuàng)新快速樣品處理流程：

1. 一步完成探針結(jié)合與酶切，操作簡(jiǎn)便快速，全流程僅需1.5小時(shí)

2. 無(wú)需生物素化探針和磁珠，成本更低

3. 回收率大于80%

4. 酶切mix穩(wěn)定性強(qiáng)，37℃ 21天，反復(fù)凍融150次，酶切活性無(wú)影響

核糖核酸酶T1（RNase T1）是通過(guò)一系列純化步驟分離得到的重組蛋白，是一種核糖核酸內(nèi)切酶。該酶在鳥苷殘基位點(diǎn)后特異性地切割單鏈RNA，產(chǎn)生3’磷酸末端。該酶通過(guò)形成核苷2’，3’-環(huán)磷酸中間體來(lái)切割3’-鳥苷殘基與鄰近核苷5’-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵。反應(yīng)產(chǎn)物是3’-GMP末端寡核苷酸。利用RNase T1核酸酶作用于鳥嘌呤核苷酸（G）3'端磷酸，切割相鄰核苷酸之間的磷酸二酯鍵，特異性地切割單鏈RNA，釋放Poly(A)序列。使用oligo-dT 磁珠對(duì)樣品進(jìn)行純化，純化后的樣品可進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS）檢測(cè)，檢測(cè)可分析其長(zhǎng)度與組成。

核糖核酸酶（Ribonuclease, RNase）在自然界中廣泛存在，即使是微量的RNase也會(huì)污染常見的分子生物學(xué)試劑，尤其會(huì)影響涉及RNA的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。因此，需要一種RNase殘留檢測(cè)試劑，可測(cè)試任何與RNA相關(guān)的溶液中是否有RNase殘留。

RNase Detection Kit提供一種方便且靈敏的熒光檢測(cè)方法，可用于檢測(cè)蛋白、核酸、試劑溶液等樣品中有無(wú)RNase。本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)包括 RNase A、RNase T1、RNase I、微球菌核酸酶、S1 核酸酶、綠豆核酸酶、Benzonase^®全能核酸酶和RNase R在內(nèi)的多種RNase。

RNase Substrate是一種新型的RNase A底物，該底物一端標(biāo)記有熒光基團(tuán)，另一端標(biāo)記有淬滅基團(tuán)，淬滅基團(tuán)的物理距離會(huì)將熒光基團(tuán)發(fā)出的熒光抑制到極低水平。通過(guò)短波紫外線照射或在熒光計(jì)中檢測(cè)，含有RNase污染的溶液會(huì)在檢測(cè)中產(chǎn)生綠色熒光，而沒(méi)有RNase的溶液不會(huì)發(fā)出熒光。

紫外條件下，可以明顯區(qū)分陰性和陽(yáng)性。